詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 |
英文名稱 | Mint3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
熱休克蛋白糖蛋白96HSP gp96英文名稱:Human Heat Shock Protein glycoprotein 96, HSP gp96
心肌營養(yǎng)素1CT-1英文名稱:Human cardiotrophln 1, CT-1
銅藍蛋白CP/CER英文名稱:Human Ceruloplasmin, CP/CER
熱休克蛋白90HSP-90英文名稱:Human Heat Shock Protein 90, HSP-90
熱休克蛋白70HSP-70英文名稱:Human Heat Shock Protein 70, HSP-70
熱休克蛋白40HSP-40英文名稱:Human Heat Shock Protein 40, HSP-40
熱休克蛋白20HSP-20英文名稱:Human Heat Shock Protein 20, HSP-20
肌球蛋白MYS英文名稱:Human Myosin, MYS
凝溶膠蛋白GS英文名稱:Human Gelsolin, GS
C反應蛋白CRP英文名稱:Human C-Reactive Protein, CRP
醛固酮ALD英文名稱:human aldosterone, ALD
肌紅蛋白MYO/MB英文名稱:Human Myoglobin, MYO/MB
心肌肌鈣蛋白ⅠcTn-Ⅰ英文名稱:Human cardiac troponin Ⅰ, cTn-Ⅰ
血管生成素2ANG-2英文名稱:Human Angiopoietin 2, ANG-2
血管生成素1ANG-1英文名稱:Human Angiopoietin 1, ANG-1
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體Pleurotus eryngii分離基物: 朽木提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 分類學研究,,栽培農(nóng)藝性狀研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Streptomyces avidinii分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia coli分離基物: 患病奶牛提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Dietzia sp.分離基物: 沉積物/箱式樣品提供形式: 凍干物模式菌株: no應用領(lǐng)域: 海洋放線菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Ganoderma sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Escherichia coli分離基物: 臟器提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 遺傳研究培養(yǎng)基: 0033生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
結(jié)腸彎曲菌種屬: Campylobacter coli分離基物: 狨猴的糞便提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領(lǐng)域: 《GB4789.28培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》標準菌株,。質(zhì)控菌株,腸道和新興傳染病研究,。培養(yǎng)基: 1,、哥倫比亞血平板
2、TSA+5%脫纖維羊血 胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g,,大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g,, 5.0g,瓊脂 15.0g,,pH7.3±0.2,。121℃,15min,。滅菌冷卻至50℃后無菌條件添加5%脫纖維羊血,。生長條件: 37℃,微需氧存儲條件: 真空冷凍干燥法
Cylindrium sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 活性物質(zhì)培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥