詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體 |
英文名稱 | CCDC153 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
煙曲霉原變種 Aspergillus fumigatus var.fumigatus
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
亞鮮紅鏈霉菌 Streptomyces subrutilus
亞熱帶鏈霉菌 Streptomyces subtropicus
雅致放射毛霉 Actimucor elegans(Eidam)Benjamin et Hesseltine
崖縣欽氏菌 Chainia yaxianensis
芽枝霉屬菌種 Cladosporium sp.
芽枝霉屬 Cladosporium sp.
芽枝孢霉屬 Cladosporium sp.
芽孢桿菌屬菌種 Bacillus sp.
神經(jīng)介素B(NMB)ELISA Kit for Neuromedin B (NMB)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)肽S(NPS)ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS)規(guī)格:48T/96T
極低密度蛋白受體(VLDLR)ELISA Kit for Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR)規(guī)格:48T/96T
早期生長應(yīng)答因子4(EGR4)ELISA Kit for Early Growth Response Protein 4 (EGR4)規(guī)格:48T/96T
26S-蛋白酶體(26S-PSM)ELISA Kit for 26S-Proteasome (26S-PSM)規(guī)格:48T/96T
骨形成蛋白6(BMP6)ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)規(guī)格:48T/96T
蛋白激酶Cζ(PKCζ)ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz)規(guī)格:48T/96T
羥脯(Hyp)ELISA Kit for Hydroxyproline (Hyp)規(guī)格:48T/96T
白介素29(IL29)ELISA Kit for Interleukin 29 (IL29)規(guī)格:48T/96T
抗原提呈關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)運蛋白(TAP)ELISA Kit for Transporter Associated With Antigen Processing (TAP)規(guī)格:48T/96T
芳香烴受體(AhR)ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR)規(guī)格:48T/96T
肌肌激酶(CKM)ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM)規(guī)格:48T/96T
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體150mgDH5α感受態(tài)細(xì)胞39831-55-582373-94-296T胎盤性酶(ALPP)HPLC≥98%抵抗素檢測試劑盒20mgLXA4605-23-2化學(xué)試劑伊默菌素(EMD)15mgDH5α感受態(tài)細(xì)胞37517-28-553209-27-196T接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)HPLC≥98%低誘導(dǎo)子3α檢測試劑盒20mgDBIL70-00-8化學(xué)試劑去泛素化酶3(DUB3)
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500mg*0感受態(tài)細(xì)胞22373-78-054706-99-996T神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(NCAM)HPLC≥98%低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5檢測試劑盒20mgIMD63231-63-0化學(xué)試劑脫鳥苷激酶(DGUOK)20mg*0感受態(tài)細(xì)胞22373-78-01085273-49-996T抗補體1q抗體(Anti-C1q)HPLC≥98%低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4檢測試劑盒5mgMK63231-63-0化學(xué)試劑二葉還原酶(DHFR)