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兔Pdgfa相關(guān)蛋白(PDAP

產(chǎn)品分類：抗生素

儲存條件  —20℃,12個月

用途  細胞培養(yǎng)抗生素

注意事項  無菌溶液,。主要由青霉素,、鏈霉素、慶大霉素等組成,經(jīng)過濾除菌,。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點，咨詢并訂購,！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線,，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃,；進樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃；分流進樣,，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存，在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細胞50-500μg/mL,；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型,，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

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心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)cTn-Ⅰ ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族7抗體包裝25g

小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)AFP-L3 ELISA KitASCL2蛋白抗體包裝5g

小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)AFP-L2 ELISA Kit磷化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g

小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)AFP-L1 ELISA Kit磷化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g

腺苷高半胱(AHCY)AHCY ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝25g

腺病毒IgG抗體(ADV IgG)ADV IgG ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝500g

纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)TAFI ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝25g

纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)PAI-1 ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝5g

纖溶原激活劑抑制物(PAI-1)PAI-1 ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝10MG

纖溶抗纖溶復合物(PAP)PAP ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝1mg

纖連蛋白(FN)FN ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體包裝5mg

細胞周期D3(Cyclin-D3)Cyclin-D3 ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體包裝5mg

AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白28抗體白介4(IL4)Osimertinib (AZD9291) is an oral, irreversible, and mutant-selective EGFR inhibi
青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液CD84/SLAMF5/FITC  熒光標記CD84IgG4-氨吡啶 99%（劇品）

SLAMF6/LY8/FITC  熒光標記SLAMF6IgG3-溴吡啶 98%

CD86/B7-2 /FITC  熒光標記CD86IgG4,4-雙(4-羥苯)戊 98.0 %

CD90/Thy-1/FITC  熒光標記CD90IgG3-吡啶 99%

ICAM-2/CD2 /FITC  熒光標記間粘附分子-2IgG2--3-硝吡啶 >99.0% (HPLC)

CD5/Endoglin/TGF- Beta receptor/FITC  熒光標記CD5/轉(zhuǎn)化生長因子β受體IgG4-吡啶鹽鹽 99%

CD5/Endoglin/TGF- Beta receptor /RBITC  紅色熒光羅丹明(RBITC)標記CD5/轉(zhuǎn)化生長因子β受體IgG1,4-環(huán)己二酮單-2,2-二三亞縮酮 98.0 %

CD7a/LAMP-1/FITC  熒光標記溶體相關(guān)膜蛋白1IgG2-煙酰 98%