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公司產品僅用于科研具有質量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點,，咨詢并訂購！

產品分類：免疫組化

儲存條件：4℃,12個月

用途：用于石蠟切片,、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛,、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。

注意事項：常用的抗原修復液,主要由檸檬酸鈉組成,調PH值6.0,。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,；柱溫120℃,；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠,。

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莖點霉屬磷化組蛋白去乙?；?/span>8抗體Human SULT4A1 ELISA Kit大鼠骨鈣(OT)免疫試劑盒

黃柄雞油菌HLA-DR抗體Human SUMF2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌人類白抗原G抗體Human SUMF1 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌高遷移率族蛋白A2抗體Human TBXAS1(Thromboxane-A synthase) ELISA Kit大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒

丁香直絲鏈霉菌高遷移率族蛋白B1抗體Human SUCLA2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒

交鏈孢菌血紅氧合2抗體Human SUCLG2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)免疫試劑盒

白金針21HOXc8抗體Human SUCLG1 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒

漏斗狀側耳（鳳尾菇）原癌基因H-ras抗體Human ARG1(Arginase-1) ELISA Kit大鼠骨保護(OPG)免疫試劑盒

核桃黃極毛桿菌Xanthomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson 質量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)楊梅苷

土生類諾氏菌Nocardioides│terrigena 質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.95%(GC)氧化槐果堿

大腸埃希氏菌DH5α/pcDNA-Gag-NC-C15S/C18SEscherichia│coli 質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)莪術二
檸檬酸鈉抗原修復液HO-2 ELISA Kit  大鼠血紅su氧合mei2規(guī)格： 48T

Cr ELISA Kit  大鼠骨膠原交聯(lián)規(guī)格： 48T

C I CP ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規(guī)格： 48T

DPD ELISA Kit  大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉規(guī)格： 48T

PY ELISA Kit  大鼠吡啶交聯(lián)物規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細胞50-500μg/mL,；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細胞類型,，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,，可設定50,，100，250,，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型,，轉染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。