真菌保存液Ⅰ公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：綿羊血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)試劑盒Anti-FLT3 Antibody人類(lèi)皰疹病8抗原
綿羊硫酸軟骨素(CS)試劑盒 Anti-FLT4 Antibody缺氧誘導(dǎo)因子1α 多肽
綿羊FMS樣激酶3(Flt3)試劑盒 Anti-FMN2 Antibody組蛋白H3樣蛋白多肽
綿羊II型前膠原氨基端原肽(PIINP)試劑盒Anti-FLT3 Antibody

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購(gòu),！

產(chǎn)品分類(lèi)：植物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：用于液體浸制真菌標(biāo)本的制作。一般真菌的保存推薦此液,。

注意事項(xiàng)：主要由乙醇,、福爾馬林等組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來(lái)水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量,，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測(cè)器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

炭黑曲霉9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人黑色瘤免疫試劑盒

大腸埃希氏菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框64抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人黑色免疫試劑盒

類(lèi)芽孢桿菌屬免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫試劑盒

亞細(xì)亞菌屬透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人核因子κB抑制物激α(IKK-α)免疫試劑盒

東方伊薩酵母周期樣Y1抗體Human CNN1(Calponin-1) ELISA Kit人核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒

根瘤菌周期J抗體Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 免疫試劑盒

青紫鏈霉菌周期L抗體Human MMP28(Matrix metalloproteinase-28) ELISA Kit人核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒

北方蜜環(huán)菌補(bǔ)體C1RL鏈多肽抗體Human CBS(Cystathionine beta-synthase) ELISA Kit人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試劑盒

釀酒酵母周期M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人核糖體蛋白S9(RPS9)免疫試劑盒

鏈霉菌周期T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人核糖體蛋白S25(RPS25)免疫試劑盒

白地霉周期K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人核糖核抑止劑(RNH1/PRI/RNH)免疫試劑盒

天藍(lán)褐鏈霉菌抗菌肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人核糖核,核糖核A家族,(肝臟,嗜性粒源性神經(jīng))(RNASE2)免疫試劑盒

釀酒酵母5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫試劑盒

大腸埃希菌4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫試劑盒

膠孢4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)免疫試劑盒

pET-23a4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核黃激(RFK)免疫試劑盒

Microsphaeropsis arundinisMicrosphaeropsis│arundinis 質(zhì)量規(guī)格：IND紫蘇烯

缺陷短波單胞菌Brevundimonas│diminuta 質(zhì)量規(guī)格：AR;IND苦蒿

立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格：0.9西瑞香
真菌保存液ⅠHSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit  人熱休克蛋白20規(guī)格： 48T

MYS(Human Myosin) ELISA Kit  人肌球蛋白規(guī)格： 48T

GS(Human Gelsolin) ELISA Kit  人凝溶膠蛋白規(guī)格： 48T

CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit  人C反應(yīng)蛋白規(guī)格： 48T

ALD(Human aldosterone) ELISA Kit  人醛固tong規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線,，來(lái)確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜,；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50,，100,，250，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。