詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體 |
英文名稱 | BLM |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
死谷芽孢桿菌現(xiàn)貨,,ATCC菌株
托拉氏假單孢菌培養(yǎng),ATCC菌株
微球菌保存,,ATCC菌株
解淀粉類芽孢桿菌售價,,ATCC菌株
寡養(yǎng)單胞菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
泛菌培養(yǎng),,ATCC菌株
氣微菌保存,,ATCC菌株
芽孢桿菌售價,ATCC菌株
亮豐富重復(fù)FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)ELISA Kit for Leucine Rich Repeat In FLII Interacting Protein 1 (LRRFIP1)規(guī)格:48T/96T
腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 9 (TNFSF9)規(guī)格:48T/96T
成纖維細(xì)胞生長因子17(FGF17)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 17 (FGF17)規(guī)格:48T/96T
激活素A受體Ⅰ(ACVR1)ELISA Kit for Activin A Receptor Type I (ACVR1)規(guī)格:48T/96T
肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)ELISA Kit for Stromal Cell Derived Factor 4 (SDF4)規(guī)格:48T/96T
α-內(nèi)啡肽(αEP)ELISA Kit for Alpha-Endorphin (aEP)規(guī)格:48T/96T
復(fù)制蛋白A1(RPA1)ELISA Kit for Replication Protein A1 (RPA1)規(guī)格:48T/96T
WAP四二化物核心域蛋白5(WFDC5)ELISA Kit for WAP Four Disulfide Core Domain Protein 5 (WFDC5)規(guī)格:48T/96T
血管生成素1(ANGPT1)ELISA Kit for Angiopoietin 1 (ANGPT1)規(guī)格:48T/96T
內(nèi)皮型一合酶(S3)ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (S3)規(guī)格:48T/96T
Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA Kit for Bcl2 Associated X Protein (Bax)規(guī)格:48T/96T
Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體Streptomyces sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Lysoserriue培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Hainesia sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)
卡爾斯伯酵母種屬: Saccharomyces carlsbergensis Hansen安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 活性干酵母培養(yǎng)基: YM培養(yǎng)基:酵母提取物 3.0 g,,麥芽提取物 3.0 g,, 葡萄糖 10.0 g, 蛋白棟 5.0 g,, 瓊脂 20.0 g,, 蒸餾水 1000 ml, pH 6.2 +/- 0.2,。121℃,,15min。生長條件: 25-28℃,,好氧
Penicillium sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 活性物質(zhì),;抗凝血培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié);礦物油法,;定期移植法
紫紅曲霉種屬: Monascus purpureus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain of M. araneosus培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
洋蔥伯克霍爾德菌種屬: Burkholderia cepacia分離基物: 廣西藥用野生稻根提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法;礦物油法
Enterococcus faecalis分離基物: 弱雛肝臟提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
擲孢酵母種屬: Sporobolomyces roseus分離基物: 未出廠的茅臺酒醅提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013或0072,生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;礦物油法
Escherichia coli分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物,;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 動物疫苗培養(yǎng)基: 411生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法