詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
產品名稱 | L型電壓依賴型鈣通道β4抗體 |
英文名稱 | CACNB4 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA試劑盒Lincomycin HCl>850mcg/mg,BR
Human Caspase-9,Casp-9 ELISA試劑盒Lincomycin HCl>850mcg/mg,BR
Human catecholamine,CA ELISA試劑盒Lincomycin HCl>850mcg/mg,BR
Human Cathepsin Antibodies,Cath Ab ELISA試劑盒Lincomycin HClHPLC含量測定
Human cathepsin D,cath-D ELISA試劑盒Liothyronine sodium>97.0%,BR
Human Cathepsin K,cath-K ELISA試劑盒Liothyronine sodium>97.0%,BR
Human Caveolin-1,Cav-1 ELISA試劑盒Liothyronine sodium>97.0%,BR
Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA試劑盒 Lomefloxacin HCl>98.5%,BR
Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA試劑盒Lomefloxacin HCl>98.5%,BR
Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA試劑盒 Lomefloxacin HCl>98.5%,BR
Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA試劑盒Lomefloxacin HCl>98.5%,BR
Human cecropin B,CecB ELISA試劑盒Lomefloxacin HCl含量測定
Human cellular fibronectin,cFn ELISA試劑盒Lotepredl Etabonate>99.0%
Human Centromere Protein,CENP-B ELISA試劑盒Lotepredl Etabonate>99.0%
Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISA試劑盒Lotepredl Etabonate>99.0%
L型電壓依賴型鈣通道β4抗體20mgButyl-Sepharose 4B -瓊脂糖凝膠4B1135-40-679559-55-096T抗化低密度脂蛋白抗體(OLAb)HPLC≥95%含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長子樣域酪激酶2檢測試劑盒20mgZAGP1830-96-6化學試劑TAO激酶2(TAOK2)100mgButyl-Sepharose 4FF -瓊脂糖凝膠4FF73463-39-528342-31-696T凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(LOX1)HPLC≥98%含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長子樣域酪激酶1檢測試劑盒20mgZFP36化學試劑TAO激酶1(TAOK1)
100mgButyl-Sepharose 4FF -瓊脂糖凝膠4FF73463-39-528342-31-696T凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(LOX1)HPLC≥98%含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長子樣域酪激酶1檢測試劑盒20mgZFP36化學試劑TAO激酶1(TAOK1)500mgButyl-Sepharose 4FF -瓊脂糖凝膠4FF73463-39-5537-73-596T凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(LOX1)HPLC≥98%含SET域4檢測試劑盒20mgZNT8化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅺ(SYT11)
500mgButyl-Sepharose 4FF -瓊脂糖凝膠4FF73463-39-5537-73-596T凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(LOX1)HPLC≥98%含SET域4檢測試劑盒20mgZNT8化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅺ(SYT11)200mgButyl-Sepharose 4FF -瓊脂糖凝膠4FF73463-39-520784-50-396T凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(LOX1)HPLC≥98%含patatin樣脂酶域3檢測試劑盒20mgNesfatin-1133-32-4化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅱ(SYT2)
200mgButyl-Sepharose 4FF -瓊脂糖凝膠4FF73463-39-520784-50-396T凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(LOX1)HPLC≥98%含patatin樣脂酶域3檢測試劑盒20mgNesfatin-1133-32-4化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅱ(SYT2)5mgButyl-Sepharose H.P. -瓊脂糖凝膠H.P.102601-34-331524-62-696T速激肽受體2(TACR2)HPLC≥98%過化脂質檢測試劑盒20mgNeopterin133-32-4化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅲ(SYT3)
5mgButyl-Sepharose H.P. -瓊脂糖凝膠H.P.102601-34-331524-62-696T速激肽受體2(TACR2)HPLC≥98%過化脂質檢測試劑盒20mgNeopterin133-32-4化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅲ(SYT3)200mgButyl-Sepharose H.P. -瓊脂糖凝膠H.P.102601-34-3523-50-296T促性腺激素釋放激素(GnRH)HPLC≥98%過化物酶體增殖物激活受體α檢測試劑盒20mgNP133-32-4化學試劑突觸囊泡蛋白Ⅳ(SYT4)