產(chǎn)品分類:免疫組化
儲存條件:4℃,6個月
用途:可以用于常規(guī)的各種切片,、涂片等的封片,,尤其適用于不能用乙醇及二甲苯處理的材料(如制作顯示乳汁管的橡膠制片),。
注意事項:主要由糊精、糖,、少量苯酚等組成
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
糖漿封片劑 | 100ml | FS-R7249 |
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,烘干,。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水,、純水洗凈,烘干,、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,,100,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Cladosporium│sp.資源名稱枝孢霉安全等級:1種屬:Cladosporium│sp.分離基物:桑葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Antrodiella albocinnamomea Y.C. Dai & Niemel?資源名稱白黃小薄孔菌(斜面)安全等級:1種屬:Antrodiella albocinnamomea Y.C. Dai & Niemel?分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Streptomyces│chartreusis Leach et al資源名稱教酒鏈霉菌安全等級:1種屬:Streptomyces│chartreusis Leach et al分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生教酒菌素(chartreusin),,抑制革蘭氏陽性細(xì)菌,、分枝桿菌。對大腸桿菌,、蠟樣芽孢桿菌的噬菌體也有作用,。
Cyathus stercoreus (Schwein.) De Toni資源名稱糞生黑蛋巢菌(斜面)安全等級:1種屬:Cyathus stercoreus (Schwein.) De Toni分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Flavodon│flavus (Klotzsch) Ryvarden資源名稱黃孢原毛平革菌安全等級:1種屬:Flavodon│flavus (Klotzsch) Ryvarden分離基物:皮部提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Ceriporia│lacerata N. Maek. Suhara & R. Kondo資源名稱撕裂蠟孔菌模式菌株:no種屬:Ceriporia│lacerata N. Maek. Suhara & R. Kondo分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物應(yīng)用領(lǐng)域:木腐菌,用于該菌種群遺傳學(xué)研究,。培養(yǎng)方法
Bacillus│aryabhattai Shivaji et al.資源名稱芽孢桿菌安全等級:1種屬:Bacillus│aryabhattai Shivaji et al.分離基物:山茶葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman資源名稱茄病鐮刀菌(不提供)模式菌株:no種屬:Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman分離基物:喜樹莖提供形式:斜面培養(yǎng)物培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14
Pseudocercospora│lilacis (Desm.) Deighton資源名稱丁香假尾孢菌安全等級:1種屬:Pseudocercospora│lilacis (Desm.) Deighton分離基物:丁香葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法
Tolypocladium│cylindrosporum W. Gams資源名稱彎頸霉屬模式菌株:no種屬:Tolypocladium│cylindrosporum W. Gams分離基物:林區(qū)土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14
Phytophthora│capsici Leonian資源名稱辣椒疫霉安全等級:1種屬:Phytophthora│capsici Leonian分離基物:辣椒莖提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:進(jìn)行分析檢測及抗病性鑒定,,指導(dǎo)。
意大青霉Penicillium│italicum 質(zhì)量規(guī)格:0.99洋川芎內(nèi)酯I
聚團(tuán)布倫茨氏菌Labrenzia│aggregata 質(zhì)量規(guī)格:光譜純SP洋川芎內(nèi)酯H
杉葉散斑殼Lophodermium│uncinatum Darker 質(zhì)量規(guī)格:0.9洋川芎內(nèi)酯A
糖漿封片劑FA ELISA Kit 大鼠葉suan規(guī)格: 48T
histon-H2b ELISA Kit 大鼠組蛋白H2b規(guī)格: 48T
-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前腦鈉su規(guī)格: 48T
GR ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固chun受體規(guī)格: 48T
LHRH ELISA Kit 大鼠黃體生成su釋放激su規(guī)格: 48T