詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類:核酸電泳
儲存條件:室溫,12個月
用途:PH指示劑,常用于電泳指示劑
注意事項:主要由電泳級溴酚藍(lán),、40%蔗糖,、去離子水組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點,,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
溴酚藍(lán)蔗糖溶液 | 10ml | FS-R7318 |
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,,100,,250,500,,750,,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
芽孢桿菌屬免疫球蛋白超家族成員10抗體Human RIMKLB ELISA KitBeta Agonists(β-)免疫試劑盒
芽胞桿菌大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體Human LRP11(Low-density lipoprotein receptor-related protein 11) ELISA Kit19-Nortestosterone(19-去甲睪)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種干擾α受體抗體Human RIMS4 ELISA Kit左右不對稱發(fā)育因子2(LEFTY2)
焦曲霉磷化干擾α受體抗體Human RIN3 ELISA Kit組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)
玫瑰皮黃鏈霉菌磷化胰島受體β抗體Human RINT1 ELISA Kit組織因子途徑抑制物(TFPI)
樟疫霉核因子κB抑制蛋白E抗體Human RING1 ELISA Kit組織因子(TF)
貝萊斯芽胞桿菌磷化整合β4抗體Human ribosomal protein L4 ELISA Kit組織型纖溶原激活劑(t-PA)
大腸埃希氏菌磷化整合β4抗體Human RIC8A ELISA Kit組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)
嗜腳動物咸海鮮球菌IQCD蛋白抗體Human DDT(D-Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)
硝鹽還原嗜鹽堿桿菌IQCC蛋白抗體Human RGS5 ELISA Kit組織多肽特異性抗原(TPS)
棲土曲霉IQCA1蛋白抗體Human RGS7(Regulator of G-protein signaling 7) ELISA Kit組織多肽抗原(TPA)
矩圓黑盤孢集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體Human RGS9 ELISA Kit組織蛋白去乙?;?HD)
孤島海桿狀菌干擾alpha 14蛋白抗體Human RGSL1 ELISA Kit組織蛋白抗體(Cath Ab)
嗜松籃狀菌白介6抗體Human RHBDD1 ELISA Kit組織蛋白S(CTSS)
環(huán)狀芽胞桿菌白介-10抗體Human RHBDL2 ELISA Kit組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)
植物乳桿菌植物亞種白介6抗體Human RHCG ELISA Kit組織蛋白K(cath-K)
AS2.590資源名稱: 平滑假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)蘆薈苷
赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)苦玄參苷IB
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)苦玄參苷IA
溴酚藍(lán)蔗糖溶液FAS/CD95 ELISA Kit 大鼠凋亡相關(guān)因子規(guī)格: 48T
EPO ELISA Kit 大鼠紅細(xì)胞生成su規(guī)格: 48T
EPOR ELISA Kit 大鼠紅細(xì)胞生成su受體規(guī)格: 48T
Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜suan粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1規(guī)格: 48T
ECF ELISA Kit 大鼠嗜suan粒細(xì)胞趨化因子規(guī)格: 48T