詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 腦組織表達X連鎖蛋白1抗體 |
英文名稱 | Bex1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
嘧隆(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
西草凈(分析標準品,97%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,97%純度:≥98%
喹禾靈(分析標準品,96%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,96%純度:≥98%
精喹禾靈(分析標準品,,98%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,98%純度:≥97%
二戊樂靈(分析標準品,99%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99%純度:≥98%
菊(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:0.95
殘殺標準溶液(100μg/ml,u=2%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100μg/ml,u=2%純度:0.95
草甘膦(分析標準品,99.5%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99.5%純度:≥98%
草甘膦標準溶液(100μg/ml,u=2%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100μg/ml,u=2%純度:≥98%
草甘膦標準溶液(10μg/ml,u=2%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10μg/ml,u=2%純度:≥98%
辛(分析標準品,99%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99%純度:≥98%
除草標準溶液(10μg/ml,u=5%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10μg/ml,u=5%純度:≥98%
2氧乙(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
丹標準溶液(100μg/ml,u=2%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100μg/ml,u=2%純度:≥98%
丹標準溶液(10μg/ml,u=6%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10μg/ml,u=6%純度:≥98%
惡草(分析標準品,97.5%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,97.5%純度:≥98%
AUP1/Ancient ubiquitous protein 1 原始廣泛存在蛋白1一抗 * 0.2ml 3isomangostin
Biglycan 骨/軟骨蛋白多糖1一抗 * 0.2ml Naringin dihydrochalcone
ALT1 谷丙氨氨基轉(zhuǎn)移酶1一抗 * 0.1ml Hygromycin B
Eph receptor A2+A3+A4 內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨激酶A2+A3+A4一抗 * 0.2ml Apiin
phosphoEph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨激酶A2+A3+A4一抗 * 0.1ml Chrysoeriol 7Oglucoside
phosphoEPH A3+A4+A5 ( Tyr779) 化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨激酶A3+A4+A5一抗 * 0.1ml Kaempferol3Orutiside
FLAP/5lipoxygenase activating protein 5脂氧合酶激活蛋白一抗 * 0.2ml Pantoprazole Sodium
IKK alpha + IKK beta KB抑制蛋白激酶α/β一抗 * 0.2ml Pantoprazole Sodium
腦組織表達X連鎖蛋白1抗體Aspergillus oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Trichoderma konigii提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃
Geobacillus stearothermophilus分離基物: 奶粉提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 55℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Scleroderma citrinum Pers.分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
變色樸素桿菌種屬: Modestobacter versicolor分離基物: 土樣/表層土提供形式: 凍干物模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 277生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces ribosidificus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Ribostamycin 核糖霉素培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Aspergillus terreus var. terreus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 蛋白酶培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Cyathus pallidus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;礦物油法;定期移植法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 遺傳工程培養(yǎng)基: 0032生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法