詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 腺苷酸環(huán)化酶10抗體 |
英文名稱 | ADCY10 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
松蘿英文名稱:Usnic acid保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白一抗
木香烴內(nèi)英文名稱:Costulide保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支四分子交聯(lián)體12一抗(四旋蛋白)
去木香內(nèi)英文名稱:Dehydrocostus lactone保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支四分子交聯(lián)體13一抗(四旋蛋白)
野漆樹苷英文名稱:Rhoifolin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支四分子交聯(lián)體20一抗(四旋蛋白)
扁蓄苷英文名稱:Avicularin保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5一抗
對香豆英文名稱:Pcoumaric acid保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白TXNDC9一抗
防諾林英文名稱:Fangji Nuo Linjian保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支轉(zhuǎn)錄因子9一抗
高良姜素英文名稱:Takara Jiangso保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支轉(zhuǎn)錄因子THOC2一抗
根皮苷英文名稱:The phloridzin保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支胸β4一抗
根皮素英文名稱:Phloretin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支腱糖蛋白R一抗
蘋果,、DL蘋果英文名稱:Malic acid, DL malic acid保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支轉(zhuǎn)移生長因子β3(TGFβ3)一抗
鬼臼毒素英文名稱:Podophyllotoxin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)一抗
亥茅苷英文名稱:Hai Mao phelic glycosides保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支特異蛋白一抗
蕓香柚皮苷英文名稱:Yun grapefruit peel glucoside保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支5色羥化酶2一抗
橙皮素英文名稱:Hesperetin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支氧還蛋白11一抗
羊藿素英文名稱:Icaritin保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支α微管蛋白酰轉(zhuǎn)移酶1一抗
脫水羊藿素英文名稱:Dehydrated icaritin保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支TANC1蛋白一抗
腺苷酸環(huán)化酶10抗體Chromohalobacter sp.分離基物: 沉積物/褐色塊狀沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酶微生物/淀粉酶培養(yǎng)基: 512生長條件: 20℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Rubulavirus Newcastle disease virus分離基物: 雞臟器提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研,、教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
Streptococcus pneumoniae提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Coronavirus Infectious bronchitis virus分離基物: 病雞提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于研究教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Pseudomonas pachastrlae分離基物: 沉積物/土灰色沉積物上覆水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1,、海洋石油污染生物修復(fù); 2,、生物活性物質(zhì)篩選,。培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Haematonectria haematococca (Berk. & Broome) Samus & Rossman分離基物: 椴樹根組織提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Avipoxvirus Fowlpox virus分離基物: 病雞提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Escherichia coli EIEC提供形式: 凍干粉安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究,《GB/T 4789.6-2003致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)》陽性對照菌株,。培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,,NaCl 5.0g,,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,,pH7.0,。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢,。pH7.0,。121℃,15min,。生長條件: 37℃,,好氧。生長特性: 革蘭氏陰性桿菌,。含侵襲性質(zhì)粒調(diào)節(jié)基因(invE)存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Klebsila pneumoniae分離基物: 痰提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法