詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 腺苷酸環(huán)化酶1抗體 |
英文名稱 | Adenylate cyclase 1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
鹽多沙普侖 英文名稱(EN):Sodium Cholate (≥99%)規(guī)格(SP):10G
鹽多沙普侖(標準品) 英文名稱(EN):Cholic acid (from ox or sheep bile, ≥...規(guī)格(SP):25G
鹽多佐;鹽杜塞 英文名稱(EN):Polyvinylpyrrolidone 10 (PVP10)規(guī)格(SP):25G
鹽多佐,;鹽杜塞(標準品) 英文名稱(EN):Sirius Rose BB (Standard Fluka, for mi...規(guī)格(SP):5G
鹽恩諾沙星 英文名稱(EN):Janus Green B (certified by the Biolog...規(guī)格(SP):1G
鹽恩諾沙星(標準品) 英文名稱(EN):India ink (certified by the Biological...規(guī)格(SP):100ML
鹽二嗪(標準品) 英文名稱(EN):Sudan Black B (certified by the Biolog...規(guī)格(SP):5G
鹽伐倫克林標記15N3 英文名稱(EN):Trypan Blue (Dye content, ≥60%)規(guī)格(SP):5G
鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋 英文名稱(EN):Toluidine Blue O (certified by the Bio...規(guī)格(SP):5G
鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋(標準品) 英文名稱(EN):Rhodamine 123 (for fluorescence, ≥90....規(guī)格(SP):5MG
鹽伐昔洛韋d4 英文名稱(EN):Acid Fuchsin (Dye content, Approx.70%)規(guī)格(SP):25G
鹽伐昔洛韋水合物 英文名稱(EN):Fluorescein isothiocyanate isomer I (F...規(guī)格(SP):50MG
鹽法舒地爾 英文名稱(EN):Fluorescein isothiocyanate isomer I (F...規(guī)格(SP):50MG
鹽法舒地爾(標準品) 英文名稱(EN):Eosin Y disodium salt (Dye content, ≥...規(guī)格(SP):10G
鹽番茄(標準品) 英文名稱(EN):Bromophel Blue (≥90%)規(guī)格(SP):5G
鹽非索非定 英文名稱(EN):Bromophel Blue (Dye content 95%, ACS)規(guī)格(SP):5G
鹽非索非定(標準品) 英文名稱(EN):Acridine Orange base, 75%規(guī)格(SP):1G
鹽芬戈莫德 英文名稱(EN):3,3',5,5'Tetramethylbenzidine (≥99%,...規(guī)格(SP):100MG
腺苷酸環(huán)化酶1抗體Bacillus sp.分離基物: 沉積物/池塘水草根淤泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 近海細菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Campylobacter fetus subsp.jejuni提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 制備血清 4培養(yǎng)基: CM0112生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Scopulariopsis sp.分離基物: 植物根際提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Aciculosporium take I. Miyake分離基物: 竹叢枝頂端葉鞘提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Pichia guilliermondii分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 436生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
Penicillium sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物,;凍干物模式菌株: no應用領域: 有拮抗金黃色葡萄球菌Staphyloccocus aureus作用培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;定期移植法
Fusarium sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗腫瘤培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié);-80℃冰箱凍結(jié)
Geobacillus stearothermophilus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 70℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
Penicillium sp.分離基物: 三七提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 轉(zhuǎn)化人參莖葉總皂苷為C-K培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥