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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>細(xì)胞檢測(cè)>>改良臺(tái)氏液

改良臺(tái)氏液

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更新時(shí)間:2022-07-05 10:19:28瀏覽次數(shù):251

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號(hào) FS-R6599 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6599
改良臺(tái)氏液公司正在銷售的產(chǎn)品:豚鼠脯/精豐富端亮豐富重復(fù)蛋白(PRELP)試劑盒Anti-IL17C Antibody跨膜蛋白59抗體
豚鼠煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)試劑盒Anti-IL17F Antibody神經(jīng)元蛋白22抗體
豚鼠半乳凝集素4(GAL4)試劑盒Anti-IL17F Antibody味覺受體蛋白家族2亞基60抗體
豚鼠抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒 Anti-IL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:細(xì)胞其他

儲(chǔ)存條件:4℃,6個(gè)月

用途:用于兩棲類動(dòng)物離體實(shí)驗(yàn),肌體灌流,、清洗組織,。并維持離體組織的正常生理功能。

注意事項(xiàng):主要由氯化鈉,、氯化鎂,、磷酸鹽、氯化鈣,、葡萄糖,、HEPES組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單,、易保存等特點(diǎn),,咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

改良臺(tái)氏液

500ml

FS-R6599

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干,。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來(lái)水、純水洗凈,,烘干、冷卻,。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來(lái)確定最佳篩選濃度,。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度,。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜,;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,,100,,250,500,,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

1-羥基-3,4,5-三氧山(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium acetate雌激誘導(dǎo)基因121蛋白抗體包裝100g

10-姜(標(biāo)準(zhǔn)品) Cellulose, Microcrystalline內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體包裝25g

10-羥基癸(標(biāo)準(zhǔn)品) alpha-Lactose, monohydrate骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體包裝500g

10-羥基癸烯,10-HDA(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium chloride, dihydrate吞噬運(yùn)動(dòng)蛋白1抗體包裝100g

10-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethylene glycol酪蛋白激受體A10抗體包裝25g

10-脫乙酰巴亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Magnesium sulfate, heptahydrate腸道病71型/手足口病病抗體包裝5g

11(α)氧基柴胡皂苷F Glucozyme轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體包裝100g

11-O-羅漢果苷V(標(biāo)準(zhǔn)品) PEG 4000酪蛋白激B3抗體包裝25g

11-O-異丁?;?12-O-乙?;试狟-3-... Potassium phosphate, dibasic, anhydrous磷化酪蛋白激受體B1+B2抗體包裝500g

11-羥基柳杉(標(biāo)準(zhǔn)品) Formamide酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體包裝10g

11-羰基-β-乙酰乳香(標(biāo)準(zhǔn)品) PEG 8000空通氣孔樣蛋白2抗體包裝50g

12-Epinapelline Lithium chloride同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體包裝100g

12-O-Tiglylphorbol-13 –isob... Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激5抗體包裝25g

13-氧-(9E,11E)-十八碳二烯 TTC,TTZ,Tetrazolium RedCD39樣蛋白1抗體包裝5g

14α-羥基Sprengerinin C Sulfamethoxypyridazine真核翻譯起始因子5抗體包裝25g

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR級(jí),可用于培養(yǎng),,純度99%以上,三合物,USP30肽聚糖識(shí)別蛋白L試劑盒蛇床子;Osthole

白色產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│albochromogenes 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定肽聚糖試劑盒升麻;Cimifugin

新月彎孢Curvularia│lunata 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6.0肽基脯酰順反異構(gòu)試劑盒圣草次苷;Eriocitrin
改良臺(tái)氏液SLT/SLT-IIe(O139) /FITC  熒光標(biāo)記抗豬水腫(O139)IgG

Slug/FITC  熒光標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子SlugIgG

Smac/DIABLO/FITC  熒光標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白IgG

phosphor-SMAD(p-Ser425),、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC  熒光標(biāo)記化SMADIgG

Smad 1/FITC  熒光標(biāo)記Smad 1IgG

Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC  熒光標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1IgG

Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC  熒光標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5IgG

Smad2/3 /FITC  熒光標(biāo)記Smad 2/3IgG


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