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免疫染色封閉液

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更新時(shí)間:2022-08-30 09:15:13瀏覽次數(shù):248

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號(hào) FS-R7283 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R7283
免疫染色封閉液公司正在銷售的產(chǎn)品:雙氫睪酮(DHT)試劑盒 Anti-OR2AG2 Antibody小鼠膠原酶II
組(HIS)試劑盒Anti-OR2A7 Antibody人巨噬來(lái)源的趨化因子
血清素/5-羥色(Serotonin/5-HT)試劑盒 Anti-OR2AG2 Antibody大鼠單核趨化蛋白4
前列腺素E2(PGE2)試劑盒Anti-OR2AJ1 Antibody小鼠膠原酶I
β萘酚

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:免疫組化

儲(chǔ)存條件:4℃,6個(gè)月

用途:免疫染色中稀釋一抗、可以防止抗體效價(jià)下降,減少抗體在組織上的非特異性吸附

注意事項(xiàng):主要由TBS,、明膠,、BSA、防腐劑等組成,。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單,、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu),!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

免疫染色封閉液

100ml

FS-R7283

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。

配制步驟:

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來(lái)確定最佳篩選濃度,。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個(gè)濃度,。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量,。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,,100,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

釀酒酵母同源異型盒基因HLX1蛋白抗體Human SNX15 ELISA Kit大鼠白介32(IL-32)免疫試劑盒

霍氏瓶霉三羥基基合成1Human SNX18 ELISA Kit大鼠白介3(IL-3)免疫試劑盒

釀酒酵母熱休克因子1抗體Human SNX19 ELISA Kit大鼠白介2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)免疫試劑盒

漢遜德巴酵母磷化熱休克因子1抗體Human SNX20 ELISA Kit大鼠白介2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)免疫試劑盒

疣孢青霉熱休克蛋白71抗體Human SNRPB ELISA Kit大鼠白介28B(IL-28B)免疫試劑盒

無(wú)花果擬盤多毛孢微絲相關(guān)蛋白hHBrk1抗體Human SMO ELISA Kit大鼠白介28A(IL-28A)免疫試劑盒

竹瘤座菌植烷酰羥化2抗體Human SNX22 ELISA Kit大鼠白介27(IL-27)免疫試劑盒

食用香料  折光指數(shù),、相對(duì)密度 A型流感病H9N1神經(jīng)型抗體Human SNAPC5 ELISA Kit大鼠白介26(IL-26)免疫試劑盒

鹽敏芽孢桿菌A型流感病H9N1血凝型抗體Human SMPDL3B(Sphingomyelin Phosphodiesterase Acid Like 3B) ELISA Kit大鼠白介23(IL-23)免疫試劑盒

多帶革孔菌人類狀瘤病33抗體Human SMPX ELISA Kit大鼠白介22(IL-22)免疫試劑盒

少根根霉A型病H1N1蛋白抗體Human SNAPIN ELISA Kit大鼠白介21(IL-21)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌甲型肝炎病聚蛋白VP1抗體Human SNCAIP ELISA Kit大鼠白介20(IL-20)免疫試劑盒

長(zhǎng)雙歧桿菌長(zhǎng)亞種造血干特異性蛋白抗體Human CALB1(Calbindin) ELISA Kit大鼠白介2(IL-2)免疫試劑盒

滑菇轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human SMNDC1 ELISA Kit大鼠白介1受體樣1(IL1RL1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌同源盒蛋白C6抗體Human SNAP29 ELISA Kit大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒

植物乳桿菌植物亞種同源盒蛋白C4抗體Human SMO ELISA Kit大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫試劑盒

肺形側(cè)耳Pleurotus│pulmonarius 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

黎巴嫩珊瑚狀放線菌屬Actinocorallia│libanotica 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品芍藥內(nèi)酯苷

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,≥99.5%(GC)仙苷
免疫染色封閉液MHC I /AgB I /H-1 I ELISA Kit  大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類規(guī)格: 48T

GATA4 ELISA Kit  大鼠GATA結(jié)合蛋白4規(guī)格: 48T

IP-/CXCL ELISA Kit  大鼠干擾su誘導(dǎo)蛋白規(guī)格: 48T

ENA-78/CXCL5 ELISA Kit  大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78規(guī)格: 48T

AT- III ELISA Kit  大鼠抗凝血meiⅢ規(guī)格: 48T


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