詳細介紹
商品介紹:
測定意義 S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,,是土壤硝態(tài)氮還原的關鍵酶。研究S-NR的活性對合理施肥,,降低氮素的損失具有重要意義,。 測定原理 S-NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O,;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,,與對–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰,,可用分光光度法測定,。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321291 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計,、臺式離心機,、移液器、1 ml玻璃比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 | 3,、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,超聲3s,,間隔10s,,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2,。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A3和A4,。△A測定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測定一次,。
扎魯司特英文名: Zearalenone from Giberella zeae磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝5g
扎托英文名: Zinc carbonate basic蛋白酪磷1C抗體包裝25g
周效磺(磺多辛)英文名: Zinc distearate磷化蛋白酪磷1C抗體包裝5g
左羥哌英文名: Zinc hydroxide磷化蛋白酪磷1C抗體包裝1g
左旋英文名: Zinc iodide磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝25g
佐米曲普坦英文名: Zinc phosphate tetrahydrate磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝5g
佐匹克英文名: Zinc sulfide磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝1g
(R)-9-[2-(二乙基磷酰氧基)基]腺英文名: Zirconium (IV) oxide磷化蛋白激C theta抗體包裝5g
5'-O-(4,4'-二氧基三基)-N6-酰...英文名: Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate磷脂酰肌激p85β抗體包裝1g
紅霉B英文名: Zirconium hydroxide hydrate磷化磷脂酰肌激p85β抗體包裝100g
(+)-5-反式前列英文名: α-(Trichloromethyl)benzyl acetate磷化蛋白磷2C亞型α抗體包裝25g
(+)-α-醋鹽英文名: Trimethylacetic acid三磷腺苷受體受體P2X2抗體包裝5g
(+)-前列英文名: Transfection Reagents-Biofection磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝1g
(+/-)-4'-羥基硫心得安英文名: trans-Cinnamaldehyde多型性腺瘤基因1蛋白抗體包裝5g
(+/-)-4-羥基鹽心得安英文名: Fullerene C60 (pure)撲克蒙蛋白抗體包裝100g
生鏈霉菌Streptomyces│chlorobiens 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品胱天蛋白1試劑盒冬凌草-對照品;有報告
托姆青霉Penicillium│thomii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品胱硫β-合試劑盒D-果糖;標準品
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品胍基丁脲解/凝集試劑盒三聚;純品型;標準品;有證書
土壤硝酸還原酶(SNR)測試盒100管/48樣蘇云金芽胞桿 二月桂酸二正辛基錫M2型酮酸激Elisa
黑木耳 1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸ⅧElisa
阿布鏈霉除瘟變種 1-二苯甲基-3-基氮雜環(huán)丁烷亞鐵螯合Elisa
錳氧化褐黃海水 3-肼基-吡啶ABO組織血型系統(tǒng)轉移Elisa
單孢哈薩克斯坦酵母 尼泊金丁酯鈉鹽己糖激1Elisa
芽孢桿 3,4-二硝基氟苯蛋白酪磷酸受體型11Elisa
無花果奇異球 2-羥基-3-吡啶甲葡萄糖6磷酸異構Elisa
蕓薹鏈格孢(可訂) 3',4'-二乙酮己糖激Elisa
謝氏酸桿 c信號轉導與轉錄激活因子1Elisa
蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草) N-Boc-2-甲酸乙酯血紅Elisa
嗜鹽棲鹽水芽孢桿 2-甲基-5,7-二氫噻吩并[3,4-d]嘧啶,;爆玉米化合物凝血原片段F1+2Elisa
腸道致病性大腸埃希氏 5-(2-溴乙?;?-2-羥基甲酯酪羥基轉移Elisa
虎掌1號* 3-溴二甲縮CD44分子Elisa
德里腐霉 1,3-苯并噻唑-6-羧酸中性粒彈性蛋白Elisa
林芝假絲酵母 苯并噻唑-2-甲酸分泌型球蛋白GElisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。