詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321198 |
商品介紹:
測定意義 高密度脂蛋白為血清蛋白之一,,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的膽固醇,,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,,是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫",,對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標,。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,,從而把膽固醇酯轉化為FC,;進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2,;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰,。 需自備的儀器和用品 離心機,,恒溫水浴鍋、可見分光光度計,、1mL玻璃比色皿,、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機,、移液器,、1 ml玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提取:
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 | 3,、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,,棄上清,,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,,棄上清,,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,,調節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A3和A4,。△A測定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測定一次,。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質,。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。
熊果;烏蘇(標準品)英文名: L-Pipecolic acid HDHD2B蛋白抗體包裝5g
繡線菊(標準品)英文名: L-Norvaline造血干特異性相關結合蛋白1抗體包裝10MG
溴東莨菪堿(標準品)英文名: L-tert-LeucineI類組織相容性H-2抗原D-Dalpha鏈抗體包裝1g
徐長卿(標準品)英文名: L-TheanineHEAT重復內含蛋白5A蛋白抗體包裝5g
續(xù)斷(川續(xù)斷)(標準品)英文名: L-Theanine熱休克蛋白70抗體包裝1g
續(xù)斷苷A英文名: D-Glucuronic acid羥類固脫氫17β抗體(17β-HSD8)包裝5g
續(xù)斷苷B英文名: L(+)-allo-Threonine透明質結合蛋白4抗體包裝250mg
玄參(標準品)英文名: Lysine acetateA型流感病H5N1凝集抗體包裝100ml
旋覆花(標準品)英文名: L-Cystine dimethyl ester dihydrochlorideA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝100g
雪膽(標準品)英文名: GSK-2636771A型流感病核衣殼蛋白抗體包裝500g
雪膽乙英文名: N-Cbz-L-threonine Benzyl EsterA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝1g
雪上一支蒿(標準品)英文名: (+)-2-Methyl-L-serineB型流感病蛋白抗體包裝5g
雪上一枝蒿(標準品)英文名: 3,3-Diphenyl-L-alanine人類狀瘤病16-E7抗體包裝100g
血根堿(標準品)英文名: α-Methyl-L-phenylalanine跨膜蛋白絲1抗體包裝25g
血竭(麒麟竭)(標準品)英文名: L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride肺癌癌基因蛋白3抗體包裝5g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規(guī)格:>98%落葉型天皰瘡抗體試劑盒1-咖啡??鼘?1-Caffeoylq
舟形毛殼Chaetomium│cymbiforme 質量規(guī)格:>97.0%,BR,可用于培養(yǎng)絡試劑盒康普瑞磷二鈉;Combretasta
酵母屬Saccharomyces│sp. 質量規(guī)格:>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑輪狀病抗原試劑盒康普瑞;Combretastatin
ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒50管/48樣毛木耳 3--2-4-香豆酸連接Elisa
大腸桿 N-芐氧羰基-L-苯氨6-芐氨基腺Elisa
聚生殼 2,4,6-三酸Bt-Cry1Ac蛋白Elisa
芽孢桿 甲基環(huán)氧烷氫ATPElisa
禾生 2,5-二苯甲酰L-苯解氨Elisa
緊密帚枝霉 硫代嗎啉1,1-二氧化物鹽酸鹽NADPH氧化Elisa
三葉草根瘤 2,3-二-5-NADP蘋果酸Elisa
釀酒酵母 2,5-二-3-Rubisco活化Elisa
根瘤 N'-芐氧羰基-L-賴叔丁酯鹽酸鹽UDP-葡萄糖焦磷酸化Elisa
草地阿格雷氏 2-甲酸乙酯苯磺酰α酮戊二酸脫氫Elisa
孢淡灰鏈霉 6-氨基-3-噠甲酸β-1,3-葡聚糖Elisa
尖孢鐮刀 3,4-二甲β-葡萄糖苷酸Elisa
平田頭菇7-2 三苯基溴γ氨基丁酸Elisa
肉葡萄球(可訂) 葡萄糖酸鎂二水合物苯解氨Elisa
總狀毛霉 二溴熒光二Elisa