迪夫快速染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠癌蛋白誘導轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)試劑盒Anti-MFAP5 Antibody信號通路Wnt6抗體
豚鼠趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)試劑盒Anti-METTL3 AntibodyWD重復膜蛋白61抗體
豚鼠血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GPX3)試劑盒 Anti-MFN1 AntibodyWnt1信號通路蛋白3抗體
豚鼠膠原酶I(Collagenase I)試

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,，咨詢并訂購,！

產(chǎn)品分類：細胞染色

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：主要用于血細胞涂片、骨髓涂片,、陰道分泌物涂片,、脫落細胞涂片的染色。

注意事項：不含固定液,。與Wright Stain類似都是利用Romanowsky Stain技術(shù)原理改良而來的,染色結(jié)果與瑞氏染色液也極其相似,但迪夫快速染色所需的時間極短,一般90s以內(nèi)即可完成染色,。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,；柱溫120℃,；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

林澤蘭內(nèi)酯C（標準品）  Dimethyl sulfoxide生長分化因子6抗體包裝25g

林澤蘭內(nèi)酯D（標準品）  Dimethyl sulfoxide鳥核苷交換因子GEFT抗體包裝5g

靈仙新苷  Dimethyl sulfoxide膠漿成熟因子β抗體包裝25g

靈芝（標準品）  Dimethyl sulfoxide蛋白偶聯(lián)受體56抗體包裝5g

靈芝內(nèi)酯B  Dimethyl sulfoxide腸和大腦特定同源蛋白2抗體包裝100MG

靈芝A(標準品) 2,2′-Dibromobiphenyl甘轉(zhuǎn)運蛋白1抗體包裝500MG

靈芝 B 2,4,5,6-Tetraaminopyrimidine sulfate salt生長激釋放激同源盒蛋白1抗體包裝1g

靈芝A(標準品) Methyl nicotinate血型糖蛋白δ抗體包裝5g

靈芝C2 N-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamide谷受體1抗體包裝25g

靈芝D(標準品) Orcinol monohydrate味覺受體蛋白家族10亞基5抗體包裝5g

靈芝D2 1-(Trifluoroacetyl)imidazole磷化谷受體1抗體包裝1g

靈芝F(標準品) 2,3-Dibromopropionamide磷化谷受體1抗體包裝5g

靈芝G(標準品) Talc磷化谷受體1抗體包裝25g

靈芝I(標準品) TalcG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝5g

靈芝LM2 pH standard－BoraxG基丁A型受體α2/GABAA Rα2抗體包裝1g

天門冬擬莖點霉Phomopsis│asparagi (Sacc.) Grove 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一合物潛伏膜蛋白1試劑盒木犀草-5-O-葡萄糖苷;Luteol

土壤桿菌Agrobacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標準品前心鈉肽試劑盒麥冬皂苷C;Ophiopogonin C

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR前纖維蛋白1抗體麥冬皂苷A;Ophiopogonin A
迪夫快速染色液MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta)  巨噬細胞炎癥因子1β 抗原規(guī)格： 0.5mg

CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta)  CD122/白介su2受體β鏈抗原規(guī)格： 0.5mg

MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2)  巨噬細胞炎癥蛋白2抗原規(guī)格： 0.5mg

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13)  基質(zhì)金屬蛋白mei13抗原規(guī)格： 0.5mg

MMP-20(matrix metalloproteinase 20)  基質(zhì)金屬蛋白mei20抗原規(guī)格： 0.5mg

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線,，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL,；細菌/植物細胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例,，可設定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當細胞過于稠密,，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。