公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),,主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成,。 測(cè)定原理 GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP,;進(jìn)一步通過(guò)反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶,、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,,通過(guò)340nm下測(cè)定NADPH的增加量,,可以計(jì)算GBSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計(jì),、水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī),、可調(diào)式移液器,、1 mL石英比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè),。
2,、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,。8000g 4℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1,、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,,直接操作,快速,、簡(jiǎn)便,。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10,。
3,、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,,鄰苯三酚法的200倍
4,、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效,。
5,、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6,、回收試驗(yàn): X =102.3%,。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),,不受類SOD物質(zhì)的干擾8,、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織,、各種體液,、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞,、細(xì)菌,、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品,、保健品等,,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,,以便 不時(shí)觀察,,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
Hederacolchiside A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Victoria blue B免疫球蛋白超家族成員12抗體包裝5g
Hederacolchiside E英文名: Brilliant Blue R草酰琥珀脫羧α抗體包裝25g
Hederagenin 3-O-α-L-rhamnop...英文名: Brilliant Blue G干擾alpha 5蛋白抗體包裝5g
Hyponine D英文名: Bromophenol blue胰島樣生長(zhǎng)因子1抗體包裝25g
Hyponine E英文名: Fast Blue B SaltKB抑制蛋白激β抗體包裝5g
Indaconitine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Alcian blue 8GX囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體包裝1g
Karacoline英文名: Blue tetrazolium胰島受體相關(guān)受體抗體包裝25g
L-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: MTTINCA1蛋白抗體包裝5g
L-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: ALLURA RED ACIQCE蛋白抗體包裝1g
L-鼠李糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Erioglaucine disodium salt雞傳染性法氏囊病病抗體包裝5g
L-細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Solifenacin succinate整合β6/Integrin β6抗體包裝1g
levatin英文名: Crystal violet磷肌磷蛋白INPP5抗體包裝25g
Lup-20(29)-en-28-oic acid, ...英文名: Crystal violet白介4誘導(dǎo)蛋白1抗體包裝5g
Monnieriside G英文名: Iodonitrotetrazolium chloride(INT)分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體包裝1g
Multicaulisin英文名: Ethyl Violet間粘附分子4抗體包裝5g
淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR粒特異性抗核抗體試劑盒金剛烷;Adamantane
南極棲海面菌Aequorivita│antarctica 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品粒趨化蛋白-2試劑盒京尼平苷;Geniposidic ac
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR粒巨噬集落激因子抗體試劑盒金石蠶苷;Poliumoside
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒25管/24樣土壤成對(duì)桿 2-酰黃色Elisa
球毛殼 4--2-甲氧基苯酸α-烯化Elisa
炭疽臟器抗原(液體) N-乙?;?2-O-(4-甲基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-7-基)-ALPHA-神經(jīng)一鈉鹽烯Elisa
假單胞屬 4,5-二氟-1,2-苯二當(dāng)量抗氧化能力Elisa
褐頂環(huán)柄菇 2,5-雙(三氟甲基)溴苯抗亞油酸氧化能力Elisa
大豆 大豆轉(zhuǎn)基因成分(陽(yáng)性) 1-甲基吡唑-4-酸頻哪酯DPPH自由基清除能力Elisa
釀酒酵母 (R)-(+)-2-溴-alpha-甲鐵氧還原能力Elisa
土壤三線鐮孢 甲基烯酸酐8-羥脫氧鳥(niǎo)苷Elisa
黑曲霉 1-Boc-3-氧哌β-羥丁酸脫氫Elisa
大肥蘑菇 2-溴-4-芪合Elisa
Arthrobacter 6-硝基吲唑腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化Elisa
大腸埃希 (S)-(+)-2,2-二甲基環(huán)烷甲酰不溶性酸性轉(zhuǎn)化Elisa
糙孢藍(lán)狀 2,5-二氟芐可溶性酸性轉(zhuǎn)化Elisa
粘狀曲霉 2,3-二氟苯甲8-氧鳥(niǎo)Elisa
米曲霉 乙酸鋯葉黃-3-乙酸Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一,、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,,每瓶140,,000單位,,稱取0.1克肝素凍干粉,,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml,。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固,。老鼠血易凝固,,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml,。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,,濕潤(rùn)管壁,,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,,直至干燥后放入4℃保存,,可使2~5ml血液不凝固。
二,、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清,;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存,。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽,、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①,、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②,、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③,、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④,、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定,。