K-EDTA公司正在銷售的產(chǎn)品：兔增殖核抗原(PCNA)試劑盒Anti-HOXA6 AntibodyT轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體
兔嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CY)試劑盒 Anti-HOXA7 Antibody轉(zhuǎn)鐵蛋白單克隆抗體
兔巨噬趨化因子(MCF)試劑盒 Anti-HOXB9 Antibody促甲狀腺素抗體
兔成纖維生長因子受體4(FGFR4)試劑盒 Anti-HP Antibody促甲狀腺素單克

產(chǎn)品分類：細胞檢測

儲存條件：室溫,24個月

用途：細胞凋亡期間Caspase活化分析

注意事項：主要由EDTA,、去離子水組成,調(diào)pH值至7.4。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點，咨詢并訂購,！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水,、純水洗凈,，烘干、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,；柱溫120℃；進樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃；分流進樣,，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線,，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞,，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當細胞過于稠密，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

匹林鈉(標準品) GeniposideDYX1C1蛋白抗體包裝5g

羥芐 （標準品） GeniposideE3泛蛋白連接dzip3抗體包裝1g

曲松鈉（標準品） 17-Methyltestosterone三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體包裝250mg

噻吩（標準品） Tetrahydro-L-Biopterin free base多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體包裝5g

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西丁（西?。藴势罚?/span> StavudineRNA結(jié)合泛連接DZIP3抗體包裝100mg

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唑肟鈉(標準品) Astragaloside IV質(zhì)分裂付出蛋白4抗體包裝1g

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褪黑,松果體（標準品） Nateglinide淋巴抗原75抗體包裝50ml

: D8(1957)資源名稱: 傷菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR維生D2試劑盒四氫小檗堿;Tetrahydroberb

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品維生C試劑盒蘇木;Hematoxylin

膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,可用于培養(yǎng)維生B6試劑盒雙醋瑞因;1,8-Diacetoxy-3
K-EDTAPhospho-PKR (Thr446) /FITC  熒光標記化蛋白激RIgG

Phospho-PKR (Thr451) /FITC  熒光標記化蛋白激RIgG

Phospho-PKR (Thr446/451) /FITC  熒光標記化蛋白激RIgG

Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC  熒光標記化內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子IgG

HSP-90 Alpha/HRP  辣根過氧化物標記熱休克蛋白90αIgG

HSP-90 Beta /HRP  辣根過氧化物標記熱休克蛋白90βIgG

CD4/HRP  辣根過氧化物標記CD4IgG

Insulin/HRP  辣根過氧化物標記胰島IgG