詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類:抗生素
儲存條件 4℃,避光,12個月
用途 強(qiáng)烈抑制哺乳動物和原核的RNA聚合酶,能抑制細(xì)菌DNA轉(zhuǎn)錄合成RNA,可用于抗結(jié)核桿菌
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點,,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
利福平溶液 | 10ml | FS-R6326 |
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
粘蛋白/粘液1(MUC1)MUC1 ELISA Kit血管生成相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
再生基因蛋白1a(REG-1a)REG-1a ELISA KitMuellerian繆勒管激抑制因子抗體包裝5g
載脂蛋白H(Apo-H)Apo-H ELISA Kit酪蛋白激受體A8抗體包裝1g
載脂蛋白E(Apo-E)Apo-E ELISA Kit脂肪酰家族成員1抗體包裝5g
載脂蛋白B48(apo-B48)apo-B48 ELISA Kit芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體包裝100mg
載脂蛋白B100(apo-B100)apo-B100 ELISA Kit磷化芳香N-乙酰化轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
載脂蛋白B100(Apo B100)Apo B100 ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝500mg
載脂蛋白B(ApoB)ApoB ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g
載脂蛋白A5(apo-A5)apo-A5 ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體包裝100mg
載脂蛋白A1(apo-A1)apo-A1 ELISA KitAFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體包裝500mg
載脂蛋白A1(Apo A1)Apo A1 ELISA Kit激活受體相互作用蛋白1抗體包裝1g
孕受體(PROGR)PROGR ELISA Kit固類還原家族7成員A2抗體包裝5g
孕(PROG)PROG ELISA Kit蛋白激AKT1,2,3抗體包裝25g
孕激/孕(PROG)PROG ELISA Kit帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體包裝5g
誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)iNOS ELISA Kit肌側(cè)索硬化蛋白2抗體包裝100g
繆勒激2型受體抗體Ⅱ型膠原(COL2)AT-406 是一種有效的,,可口服的 Smac 模擬物,,為 IAPs 的拮抗劑,能夠抑制 XIAP,,cIAP1 和 cIAP2 蛋白,,Ki 值分別為 66.4,
利福平溶液CD18/LFA-1/FITC 熒光標(biāo)記白粘附蛋白IgG四對苯二 98%
CD19/FITC 熒光標(biāo)記CD19IgG硫鈰,四水 AR,,98%
Phospho-CD19 (Tyr531) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠化CD19IgG硝鈰,,六水 99.5% metals basis
CD19/PE 熒光PE標(biāo)記CD19IgG醋鈰 99.99% metals basis
CD20/FITC 熒光標(biāo)記CD20IgG硫鈰,四水 99.9% metals basis
CD20/Biotin 生物化CD20IgG硝釓,六水 AR,,99%
CD20/MS4A1/PE 熒光PE標(biāo)記CD20IgG硝釹,六水 AR,99.0 %
CD25/IL-2RA /PE-Cy5 熒光PE-Cy5標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠白介2受體a鏈IgG醋釹 99.9% metals basis