詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 銜接蛋白α-Adaptin抗體 |
英文名稱 | alpha Adaptin |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
地平相關物質(zhì)A標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
青標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Penicillin G Potassium
馬來那敏標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Chlorpheniramine Maleate
馬來那敏緩釋標準品(藥物釋放校正)
規(guī)格:60tables 英文名稱:
加壓素標準品 規(guī)格:1.78mg 英文名稱:
奧比沙星標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Orbifloxacin
阿魏標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
鹽咪嗪標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Imipramine Hydrochloride
芬標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Baclofen
維諾標準品 規(guī)格:0.7ml 英文名稱:Ethchlorvyl CIV
卡波樹脂 進口,、國產(chǎn) PolyacrylicresinⅢ 含量:AR,98%
卡芥 進口,、國產(chǎn) BCNU 含量:親合層析純,,1.95ug/ml
卡爾費休試劑(含) 進口、國產(chǎn) KarlFlscherreagent 含量:BR,,94%
卡拉膠類型III 進口,、國產(chǎn) KCarrageenanKarraType 含量:AR,,98%
卡拉膠類型V 進口,、國產(chǎn) ICarrageenanIOTAType 含量:BR,98%
卡氏試液 進口,、國產(chǎn) KarlFlscherreagent 含量:CP,,99%
抗壞血 進口、國產(chǎn) VC 含量:顯色劑,,80%
抗菌素 進口,、國產(chǎn) Zeocin 含量:USP級,,9001050mcg/mg
抗痛素 進口、國產(chǎn) Antipaindihydrochloride 含量:生物技術級,,600u/mg
鈧氧 進口,、國產(chǎn) Scandiumoxide 含量:BR,98%
銜接蛋白α-Adaptin抗體Cyt-C 檢測試劑盒 細胞色素C* 規(guī)格: 48T/96T
cytb561(Human lipocalin 2) 檢測試劑盒 細胞色素b561* 規(guī)格: 48T/96T
CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) 檢測試劑盒 囊蟲病抗體* 規(guī)格: 48T/96T
CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes) 檢測試劑盒 半胱氨酰白三烯* 規(guī)格: 48T/96T
Cys-C(Mouse Cystatin C) 檢測試劑盒 半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C* 規(guī)格: 48T/96T
Cys-C(Human Cystatin C) 檢測試劑盒 半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C* 規(guī)格: 48T/96T
Cys-C 檢測試劑盒 半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C* 規(guī)格: 48T/96T