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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
丁胺卡那霉素溶液 | 10ml | FS-R6324 |
產(chǎn)品分類:抗生素
儲(chǔ)存條件 —20℃,避光,12個(gè)月
用途 又稱硫酸阿米卡星,,抗菌譜與慶大霉素相似,但對(duì)耐卡那霉素、妥布霉素和慶大霉素的細(xì)菌包括綠膿桿菌和沙雷氏桿菌仍有效,。
注意事項(xiàng) 無菌溶液,經(jīng)過濾除菌,。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,烘干,。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水,、純水洗凈,烘干,、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1,、3,、7,、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)TRAF6 ELISA Kit磷化Ack1抗體包裝5g
腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)TNFRSF11A/RANK ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g
腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子1(TL1)TL1 ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激β1抗體包裝5g
腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)TNFsR-Ⅱ ELISA Kit磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝25g
腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)TNFsR-Ⅰ ELISA Kit磷化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體包裝5g
腫瘤壞死因子β(TNF-β)TNF-β ELISA Kit磷化三磷腺檸檬裂解抗體包裝100ml
腫瘤壞死因子α(TNF-α)TNF-α ELISA Kit磷化ATR抗體包裝25ml
腫瘤壞死因子α(TNFα)TNFα ELISA Kit核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體包裝500ml
腫瘤蛋白p53(TP53)TP53 ELISA Kit天門冬酰連接糖基化11抗體包裝1g
腫瘤標(biāo)志物(CA724)CA724 ELISA Kit衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體包裝1ml
中性粒細(xì)胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)NGAL ELISA Kit基糖苷類磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g
中性粒細(xì)胞彈性蛋白(NE)NE ELISA Kit唾液糖蛋白受體1抗體包裝25g
脂氧A4(LXA4)LXA4 ELISA Kit芳香基硫酯F抗體包裝5g
脂聯(lián)(ADP)ADP ELISA KitA激錨定蛋白5抗體包裝1mg
脂聯(lián)(Acrp30)Acrp30 ELISA Kit小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體包裝100g
γ2肌動(dòng)蛋白抗體甘脫氫(GLDC)Infigratinib (BGJ-398; NVP-BGJ398) 是 FGFR 家族的有效抑制劑,,抑制 FGFR1,F(xiàn)GFR2,,F(xiàn)GFR3 和 FGFR4
丁胺卡那霉素溶液CD3/FITC 熒光標(biāo)記CD3蛋白IgG硫亞鈰八水 99.9% metals basis
CD3/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記CD3IgG硫亞鈰,無水 97%
CD3/PE 熒光PE標(biāo)記CD3IgG化鎳 CP,98.0%
CD4/FITC 熒光標(biāo)記CD4蛋白IgG鈮粉 99.95% metals basis,325目
CD4/RBITC 紅色熒光羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD4IgG偏釩銀 CP
CD4/PE 熒光PE標(biāo)記CD4IgG氧化釤 99.99% metals basis
CD5/FITC 熒光標(biāo)記CD5IgG亞硝鈷鈉 AR,Co 13.5~14.5%
CD5L/Api6/FITC 熒光標(biāo)記CD5LIgG鋯粉 99.5% metals basis ((不包括鉿)),200 目
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。