胰蛋白酶抑制劑溶液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-ZNF329 Antibody人脂蛋白脂酶
Anti-ZNF287 Antibody人糖原磷酸化酶同工酶II
Anti-ZNF337 Antibody人糖原磷酸化酶同工酶MM
Anti-ZNF384 Antibody人糖原磷酸化酶同工酶BB
Anti-ZNF420 Antibody人脂蛋白α
Anti-ZNF397 Antibody人骨膠原交聯(lián)
An

產(chǎn)品分類：酶抑制劑

儲存條件：—20℃,避光,18個月

用途：胰蛋白酶抑制劑

注意事項：工作濃度0.1ug/ml

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,，咨詢并訂購,！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,；柱溫120℃；進樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當細胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

矩圓黑盤孢腎結(jié)合蛋白抗體Anti-DKK2 Antibody載脂蛋白A2(APOA2)

科羅多擬無枝菌RET指蛋白樣2/3抗體Anti-DLD Antibody(PB0608)載脂蛋白A1(APOA1)

釀酒酵母RFESD蛋白抗體Anti-DLG1 Antibody(PB0592)甾-O-?；D(zhuǎn)移2(SOAT2)

灰色鏈霉菌灰色亞種胰島再生因子β抗體Anti-DLG4 Antibody甾-O-酰基轉(zhuǎn)移1(SOAT1)

莢膜紅細菌環(huán)指蛋白160抗體Anti-DLG3 Antibody運動因子相關(guān)蛋白1(MRP1)

微桿菌屬視黃脫氫13抗體Anti-DLG4 Antibody(PB0859)運動神經(jīng)元生存蛋白2(SMN2)

辣椒盤孢環(huán)指蛋白75抗體Anti-DLL1 Antibody孕烷X受體(PXR)

橙鱗傘8RIT1蛋白抗體Anti-DLL3 Antibody孕免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)

大腸埃希氏菌環(huán)指蛋白19B抗體Anti-DLL4 Antibody孕(Pg)

橙灰紫旋鏈霉菌胰島β生長因子抗體Anti-DMRT1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白4(TMOD4)

腸沙門氏菌腸亞種波恩血清型環(huán)指蛋白149抗體Anti-DNAJA2 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)

地衣芽孢桿菌心臟蛋白磷1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體Anti-DMD Antibody(PB0292)原肌球調(diào)節(jié)蛋白2(TMOD2)

甲速測管環(huán)指蛋白180抗體Anti-DNAJA1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白1(TMOD1)

茶藨子葡萄座腔菌環(huán)指蛋白123抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白4(TPM4)

弗雷德里克斯堡假單胞菌軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白3(TPM3)

豇豆慢生根瘤菌環(huán)指蛋白210抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白2β(TPM2)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

微小鏈霉菌Streptomyces│parvulus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

: 205234資源名稱: 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
胰蛋白酶抑制劑溶液ATF3/FITC  熒光su標記活化轉(zhuǎn)錄因子3IgG規(guī)格： 0.2ml

ATF4/FITC  熒光su標記活化轉(zhuǎn)錄因子4IgG規(guī)格： 0.2ml

ATF6/FITC  熒光su標記活化轉(zhuǎn)錄因子6IgG規(guī)格： 0.2ml

ATG1/ULK1/FITC  熒光su標記自噬相關(guān)蛋白1IgG規(guī)格： 0.2ml

ATG7/FITC  熒光su標記自噬相關(guān)蛋白7IgG規(guī)格： 0.2ml