詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 鈣調(diào)節(jié)素抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素) |
英文名稱 | Calmodulin |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
補體因子D(CFD)沙漠類芽胞桿菌拉丁屬名: Paenibacillus deserti
血漿纖維連接蛋白(pFN) 居泉沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia fonticola
細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn) 薄黑孔菌拉丁屬名: Nigroporus vinosus
總蛋白S(TPS)釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)平菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)繩狀青霉拉丁屬名: Penicillium funiculosum
血漿抗凝蛋白S(PS) 淺黃隱球酵母拉丁屬名: Cryptococcus flavescens
血漿抗凝蛋白C(PC) 居真菌細(xì)菌拉丁屬名: Mycetocola sp.
免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)燼灰產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces cinerochromogenes
嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB) 叢毛單胞菌用途: 在無機鹽培養(yǎng)基中以60mg/L的甲酸為碳源培養(yǎng),,3天內(nèi)降解率大于90%
凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)中國臺灣根霉拉丁屬名: Rhizopus formosensis Nakazawa
凝血因子Ⅲ(FⅢ)密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種拉丁屬名: Clavibacter michiganensis subsp. tessellarius
補體1q(C1q)大腸埃希菌拉丁屬名: coli
血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)板栗蛇孢日規(guī)殼拉丁屬名: Ophiognomonia castanea
胸腺肽α1(Thymosin α1) 間型假絲酵母拉丁屬名: Candida intermedia
鈣調(diào)節(jié)素抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素)環(huán)磷酰胺(CTX)ELISA試劑盒英文名稱:Human Cyclophosphamide,CTX ELISA Kit*
黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒英文名稱:Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,,LHRH ELISA Kit *
混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒英文名稱:human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit進(jìn)口/原裝
活化蛋白C(APC) ELISA試劑盒英文名稱:Human activated protein C,,APC ELISA Kit進(jìn)口/分裝
活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒英文名稱:Human activated protein C resistance,APCR ELISA Kit進(jìn)口/原裝
活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒英文名稱:Human activated coagulation factor Ⅻ,FⅫa ELISA Kit進(jìn)口/原裝豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒 組裝/原裝
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 組裝/原裝
豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 組裝/原裝
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 組裝/原裝