詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 |
英文名稱 | AKAP95 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
外消旋5羧基托特羅定 英文名稱(EN):Ginseside F2 (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋7羥基心得安 英文名稱(EN):29H,31HPhthalocyanine (98%)規(guī)格(SP):1G
外消旋N去異嗪 英文名稱(EN):Compound K (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋α羥基布洛芬 英文名稱(EN):Corosolic Acid,≥98%(HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋布洛芬 英文名稱(EN):Acetal (96%)規(guī)格(SP):25G
外消旋反式羥基格列本脲 英文名稱(EN):Lupeol (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋反式N去鹽舍曲林 英文名稱(EN):Betulin (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋反式舍曲林 英文名稱(EN):Diosgenin glucoside (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋卡洛芬d3 英文名稱(EN):Isolinderalactone (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋拉呋替 英文名稱(EN):Homovanillic acid (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋馬來噻嗎洛爾 英文名稱(EN):20(R)Protopanaxdiol (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋去基奧昔布寧鹽鹽 英文名稱(EN):Vindoline (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋去異基托特羅定 英文名稱(EN):Catharanthine (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋全反式4羥基視黃 英文名稱(EN):Isoliquiritigenin (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋噻嗎洛爾d5 馬來鹽 英文名稱(EN):Asperosaponin Ⅵ (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋順式羥基格列本脲 英文名稱(EN):Apigenin7OβDglucopyraside (≥9...規(guī)格(SP):20MG
外消旋順式羥基格列本脲d3,13C 英文名稱(EN):Araloside V (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
外消旋順式N去鹽舍曲林 英文名稱(EN):2Nitrophenyl βDCellobioside規(guī)格(SP):100MG
蛋白激酶A錨定蛋白95抗體HGF 檢測試劑盒 肝細(xì)胞生長因子* 規(guī)格: 48T/96T
HG(Human Herpes Gestation) 檢測試劑盒 皰疹抗體* 規(guī)格: 48T/96T
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) 檢測試劑盒 心型脂肪酸結(jié)合蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
HFABP 檢測試劑盒 rat (Heartfattyacid -bindingprotein) 心臟脂肪酸結(jié)合蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
HEV-IgM(Human Hepatitis D virus IgM) 檢測試劑盒 戊型肝炎病毒IgM* 規(guī)格: 48T/96T
HEV-IgG(Human hepatitis E virus IgG) 檢測試劑盒 戊型肝炎病毒IgG* 規(guī)格: 48T/96T
HELIX- II (Human type II collagen helical peptide) 檢測試劑盒 Ⅱ型膠原螺旋肽* 規(guī)格: 48T/96T