詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | ADP核糖基化樣因子8B抗體 |
英文名稱 | ARL8B |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
乳果糖1gLactulose*室溫保存
溶藻弧菌PCR檢測試劑盒50T* 低溫運輸,-20℃保存
溶血性鏈球菌熒光PCR檢測試劑盒50T* 低溫運輸,,-20℃保存
溶血性鏈球菌AR檢測試劑盒50T* 低溫運輸,,-20℃保存
溶菌酶溶液,10mg/mL1.5mLLysozyme Solution*-20℃保存
溶菌酶干粉10gLysozyme Powder*4℃或-20℃保存
溶菌酶1gLysozyme, Egg White*-20℃保存
溶壁酶干粉1gLywallzyme Powder*-20℃干燥保存(3個月以上),,或4℃干燥保存(3個月以內(nèi))
日本血吸蟲PCR檢測試劑盒50T* 低溫運輸,,-20℃保存
人注意缺陷多巴載脂蛋白基因多態(tài)性PCR檢測試劑盒50T* 低溫運輸,-20℃保存
pTrcHis A2 ugpTrcHis A* 低溫運輸,,-20℃保存
pTrcHis 2b2 ugpTrcHis 2b* 低溫運輸,,-20℃保存
pTrcCKS2 ugpTrcCKS* 低溫運輸,-20℃保存
pTrc99a2 ugpTrc99a* 低溫運輸,,-20℃保存
pTracer EF/V5-His A2 ugpTracer EF/V5-His A* 低溫運輸,,-20℃保存
pTracer CMV22 ugpTracer CMV2* 低溫運輸,-20℃保存
pTK-Luc2 ugpTK-Luc* 低溫運輸,,-20℃保存
pTK-Hyg2 ugpTK-Hyg* 低溫運輸,,-20℃保存
pThio-His A2 ugpThio-His A* 低溫運輸,-20℃保存
pTH-304-18Z2 ugpTH-304-18Z* 低溫運輸,,-20℃保存
ADP核糖基化樣因子8B抗體克魯斯假絲酵母種屬: Candida krusei提供形式: 斜面培養(yǎng)物,;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)甘油培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Yersinia pseudotuberculosis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Yarrowia lipolytica分離基物: 生物樣/鰶 頭鰓提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 共生微生物/魚類共生菌培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法
Gibberla zeae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法,;礦物油法
Aspergillus niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)檸檬酸,。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 35℃存儲條件: 礦物油法
拜氏梭菌種屬: Clostridium beijerinckii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Arthrobacter scleromae分離基物: 土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 848生長條件: 4℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Agaricus bisporus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃
Candida sp.分離基物: 側(cè)耳培養(yǎng)基提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長條件: 28-42℃存儲條件: 真空冷凍干燥法