詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 12號(hào)染色體開放閱讀框54抗體 |
英文名稱 | C12ORF54 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
扣囊內(nèi)孢霉現(xiàn)貨,,ATCC菌株
魯氏結(jié)合酵母培養(yǎng),ATCC菌株
熒光威克酵母保存,,ATCC菌株
頭狀絲孢酵母售價(jià),,ATCC菌株
乳酸鏈球菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
Marivitacryptomonadis培養(yǎng),,ATCC菌株
藤黃八疊球菌保存,,ATCC菌株
變形桿菌售價(jià),ATCC菌株
肌糖β(SGCβ)ELISA Kit for Sarcoglycan Beta (SGCb)規(guī)格:48T/96T
卷曲同源物2(FZD2)ELISA Kit for Frizzled Homolog 2 (FZD2)規(guī)格:48T/96T
羧肽酶O(CPO)ELISA Kit for Carboxypeptidase O (CPO)規(guī)格:48T/96T
Intersectin 2蛋白(ITSN2)ELISA Kit for Intersectin 2 (ITSN2)規(guī)格:48T/96T
鈣同線蛋白3(CLSTN3)ELISA Kit for Calsyntenin 3 (CLSTN3)規(guī)格:48T/96T
肼裂解酶(NRD1)ELISA Kit for Nardilysin (NRD1)規(guī)格:48T/96T
耐扭蛋白2A(TOR2A)ELISA Kit for Torsin 2A (TOR2A)規(guī)格:48T/96T
剪接因子4(SF4)ELISA Kit for Splicing Factor 4 (SF4)規(guī)格:48T/96T
外周蛋白(PRPH)ELISA Kit for Peripherin (PRPH)規(guī)格:48T/96T
突觸融合蛋白17(STX17)ELISA Kit for Syntaxin 17 (STX17)規(guī)格:48T/96T
CopineⅤ蛋白(CPNE5)ELISA Kit for Copine V (CPNE5)規(guī)格:48T/96T
Tescalcin蛋白(TSC)ELISA Kit for Tescalcin (TSC)規(guī)格:48T/96T
12號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE 檢測(cè)試劑盒 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶* 規(guī)格: 48T/96T
MOG 檢測(cè)試劑盒 (human) 抗髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白()* 規(guī)格: 48T/96T
MN(Human metanephrine) 檢測(cè)試劑盒 變腎上腺素* 規(guī)格: 48T/96T
MN(Human Mannose) 檢測(cè)試劑盒 甘露糖* 規(guī)格: 48T/96T
MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) 檢測(cè)試劑盒 黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子* 規(guī)格: 48T/96T
MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) 檢測(cè)試劑盒 基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B* 規(guī)格: 48T/96T
MMP-9/Gelatinase B 檢測(cè)試劑盒 基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B* 規(guī)格: 48T/96T