詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 染色體相關(guān)蛋白H抗體 |
英文名稱 | CAPH |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
灰葡萄孢現(xiàn)貨,ATCC菌株
溫特曲霉培養(yǎng),,ATCC菌株
棲土曲霉保存,,ATCC菌株
醬油曲霉售價,ATCC菌株
寄生曲霉現(xiàn)貨,,ATCC菌株
嗜熱鏈霉菌培養(yǎng),,ATCC菌株
華美鏈霉菌保存,ATCC菌株
玫瑰色鏈霉菌售價,ATCC菌株
載蛋白A2(APOA2)ELISA Kit for Apolipoprotein A2 (APOA2)規(guī)格:48T/96T
10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)ELISA Kit for Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)規(guī)格:48T/96T
蛋白S(PROS)ELISA Kit for Protein S (PROS)規(guī)格:48T/96T
嗜鉻蛋白A(CHGA)ELISA Kit for Chromogranin A (CHGA)規(guī)格:48T/96T
一合酶相互作用蛋白(SIP)ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Interacting Protein (SIP)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)規(guī)格:48T/96T
聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA Kit for Aggrecan (AGC)規(guī)格:48T/96T
叉頭框蛋白M1(FOXM1)ELISA Kit for Forkhead Box Protein M1 (FOXM1)規(guī)格:48T/96T
蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd)規(guī)格:48T/96T
紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA Kit for Erythropoietin (EPO)規(guī)格:48T/96T
補體因子B(CFB)ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa)規(guī)格:48T/96T
染色體相關(guān)蛋白H抗體100mgNi Sepharose 6FF 鎳-瓊脂糖凝膠6FF His標(biāo)簽化樹脂(Ni-NTA Resin)41689-31-06468-55-996T己糖激酶1(HK1)HPLC≥98%骨成型蛋白受體Ⅱ檢測試劑盒5mgVEGFR-158-61-7化學(xué)試劑上池蛋白(SBSN)750mgNi Sepharose H.P. 鎳-瓊脂糖凝膠H.P.41689-31-051014-29-096T己糖激酶1(HK1)HPLC≥98%骨成型蛋白受體1A檢測試劑盒20mgVEGFR-258-61-7化學(xué)試劑肉瘤抗原1(SAGE1)
750mgNi Sepharose H.P. 鎳-瓊脂糖凝膠H.P.41689-31-051014-29-096T己糖激酶1(HK1)HPLC≥98%骨成型蛋白受體1A檢測試劑盒20mgVEGFR-258-61-7化學(xué)試劑肉瘤抗原1(SAGE1)100mgNi Sepharose H.P. 鎳-瓊脂糖凝膠H.P.124-68-528610-30-296T己糖激酶1(HK1)HPLC≥98%骨成型蛋白7檢測試劑盒20mgVCAM-158-61-7化學(xué)試劑旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)
100mgNi Sepharose H.P. 鎳-瓊脂糖凝膠H.P.124-68-528610-30-296T己糖激酶1(HK1)HPLC≥98%骨成型蛋白7檢測試劑盒20mgVCAM-158-61-7化學(xué)試劑旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)25mgoctyl-Sepharose CL-4B 辛-瓊脂糖凝膠CL-4B124-68-5173101-54-796TⅣ型膠原(COL4)HPLC≥98%骨成型蛋白2檢測試劑盒20mgES58-61-7化學(xué)試劑濕結(jié)合蛋白(RTBDN)
25mgoctyl-Sepharose CL-4B 辛-瓊脂糖凝膠CL-4B124-68-5173101-54-796TⅣ型膠原(COL4)HPLC≥98%骨成型蛋白2檢測試劑盒20mgES58-61-7化學(xué)試劑濕結(jié)合蛋白(RTBDN)500mgoctyl-Sepharose CL-4B 辛-瓊脂糖凝膠CL-4B115-69-5169105-89-996T中期子(MK)HPLC≥98%骨成型蛋白15檢測試劑盒20mgSvap-160-92-4化學(xué)試劑休眠蛋白(RSN)
500mgoctyl-Sepharose CL-4B 辛-瓊脂糖凝膠CL-4B115-69-5169105-89-996T中期子(MK)HPLC≥98%骨成型蛋白15檢測試劑盒20mgSvap-160-92-4化學(xué)試劑休眠蛋白(RSN)200mgoctyl-Sepharose CL-4B 辛-瓊脂糖凝膠CL-4B115-69-5480-19-396T胰島素樣生長子1(IGF1)HPLC≥98%骨保護素檢測試劑盒20mgANG-160-92-4化學(xué)試劑Repetin蛋白(RPTN)