詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 |
英文名稱 | CCDC8 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
聚乙二20000 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥98%
2氨基噻唑(>98%,,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,,BR純度:≥98%
化鈰七水 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.9%純度:≥95%
D阿拉伯糖(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥95%
D阿拉伯糖 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
米吐爾(>98%,BC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC純度:≥98%
鹽吡哆醛 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
硅油 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥98%
溴化鈉 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,AR純度:≥98%
六偏鈉 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥95%,Tech Grade純度:≥98%
無脂肪牛血清白蛋白 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,分子生物學級純度:≥98%
心肌黃酶(>30U/mg,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>30U/mg,BR純度:≥98%
水溶毛地黃皂苷 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:進分,BR純度:≥98%
DSP 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥97%
谷氨脫酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>10 U/mg,BC純度:≥98%
對羥基三唑 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪酶相關(guān)蛋白1一抗 * 0.1ml Tadalafil
BMP15 骨形態(tài)發(fā)生蛋白15一抗 * 0.1ml 17AAG
BCAT1 胞漿支鏈氨基轉(zhuǎn)氨酶一抗 * 0.1ml 17AAG
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5一抗 * 0.1ml Terazosin HCl
Hepatic lipase 肝脂酶一抗 * 0.2ml Testosterone
GABA Transporter 1/GAT1 γ氨基運載蛋白1一抗 * 0.1ml Testosterone
PAPPA 相關(guān)血漿蛋白A一抗 * 0.1ml Tetracaine HCl
PPT1 棕櫚酰蛋白酶1一抗 * 0.2ml Tetracaine HCl
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體100mgLB體培養(yǎng)(干)18378-89-7115713-06-996T環(huán)加酶1(PTGS1)HPLC≥97%催產(chǎn)素檢測試劑盒20mgt-PA3736-77-4化學試劑B-色素瘤抗原(BAGE)200mgLB固體培養(yǎng)(干)18378-89-777690-92-796T環(huán)加酶1(PTGS1)HPLC≥98%促胰素/胰泌素檢測試劑盒20mgTF3736-77-4化學試劑精酰轉(zhuǎn)移酶1(ATE1)
200mgLB固體培養(yǎng)(干)18378-89-777690-92-796T環(huán)加酶1(PTGS1)HPLC≥98%促胰素/胰泌素檢測試劑盒20mgTF3736-77-4化學試劑精酰轉(zhuǎn)移酶1(ATE1)200mgLB體培養(yǎng)(體)24280-93-196T骨形成蛋白6(BMP6)HPLC≥98%促胰素/分泌素受體檢測試劑盒20mgTFPI3736-77-4化學試劑鱷失調(diào)蛋白(ATCAY)
200mgLB體培養(yǎng)(體)24280-93-196T骨形成蛋白6(BMP6)HPLC≥98%促胰素/分泌素受體檢測試劑盒20mgTFPI3736-77-4化學試劑鱷失調(diào)蛋白(ATCAY)200mgLB營養(yǎng)瓊脂(LB固體培養(yǎng),干)24280-93-123513-14-696T骨形成蛋白6(BMP6)HPLC≥98%促性腺激素釋放激素檢測試劑盒20mgTFPI-22140-76-3化學試劑星形肌動蛋白2(ASTN2)
200mgLB營養(yǎng)瓊脂(LB固體培養(yǎng),干)24280-93-123513-14-696T骨形成蛋白6(BMP6)HPLC≥98%促性腺激素釋放激素檢測試劑盒20mgTFPI-22140-76-3化學試劑星形肌動蛋白2(ASTN2)200mgM17肉湯 24280-93-1555-66-896T骨形成蛋白6(BMP6)HPLC≥98%促酰化蛋白檢測試劑盒20mgLASPAR2140-76-3化學試劑星形肌動蛋白1(ASTN1)
200mgM17肉湯 24280-93-1555-66-896T骨形成蛋白6(BMP6)HPLC≥98%促?;鞍讬z測試劑盒20mgLASPAR2140-76-3化學試劑星形肌動蛋白1(ASTN1)30mgMRS肉湯1263-89-494367-43-896T親環(huán)素A(CYPA)HPLC≥98%促胃素受體檢測試劑盒20mgL-Carnitine26929-65-7化學試劑天冬酰酶(ASPG)