詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 血管生成素相關蛋白6抗體 |
英文名稱 | ANGPTL6 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
腸病毒Enterovirus英文名稱:Human Enterovirus
百日咳毒素PT英文名稱:Human Pertussiu Toxin, PT
白色念珠菌C.albicans英文名稱:Human Candida Albicans, C.albicans
流行性乙型腦炎抗體IgGJE IgG英文名稱:Human Coronaviruses IgG
不耐熱腸毒素B亞單位LTB英文名稱:Human heat-labile enterotoxin B subunit, LTB
沙眼衣原體抗體CT英文名稱:Human Chlamydia trachomatis, CT
血吸蟲schistosoma英文名稱:human schistosoma
輪狀病毒抗原RV Ag英文名稱:Human Rotavirus antigen, RV Ag
軍團菌抗原LP Ag英文名稱:Human Legionella pneumophila antigen, LP Ag
大腸菌素colicin英文名稱:human colicin
腺病毒抗原ADV-Ag英文名稱:Human Adenovirus Antigen, ADV-Ag
破傷風抗體Tetanus Ab英文名稱:Human Tetanus Antibody
鉤端螺旋體IgMLebtospira英文名稱:Human Lebtospira IgM
鉤端螺旋體IgGLep IgG英文名稱:Human Leptospira IgG, Lep IgG
阿米巴Amebiasis英文名稱:Human Amebiasis
血管生成素相關蛋白6抗體Bacillus amyloliquefaciens分離基物: LB培養(yǎng)基提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 可以作為研究抑真菌作用相關基因的工程菌培養(yǎng)基: 33生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法
恥垢分枝桿菌種屬: Mycobacterium Mycobacterium smegmatis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
Rhizopus stolonifer var. stolonifer提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 22℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Thermoanaerobacter ethanlicus分離基物: 高溫溫泉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 纖維素高溫厭氧降解培養(yǎng)基: 0491生長條件: 65℃存儲條件: 定期移植法
Candida tropicalis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Streptomyces intermedius分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 生物活性微生物:抗菌活性譜:金黃色葡萄球菌 -- 枯草芽孢桿菌 -- 大腸埃希氏菌 -- 熒光假單胞菌 -- 白假絲酵母 20 宛氏擬青霉 25培養(yǎng)基: 1002生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法,;真空冷凍干燥法
Antrodia wangii Y.C. Dai & H.S. Yuan分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Myrothecium verrucaria提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Bacillus thuringiensis subsp. ostriniae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法