詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 細胞分裂周期樣激酶2抗體 |
英文名稱 | CLK2 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
鹽倍他司汀 英文名稱(EN):CAPS (pH 3.07.0 [20 ℃], ≥98.0%)規(guī)格(SP):25G
鹽倍他司?。藴势罚?/font> 英文名稱(EN):BISTRIS Propane (cell culture tested,...規(guī)格(SP):25G
鹽倍他司汀d3 英文名稱(EN):BISTRIS (cell culture tested, ≥98%)規(guī)格(SP):25G
鹽達莫司汀 英文名稱(EN):BICINE (≥99%)規(guī)格(SP):10G
鹽達莫司?。藴势罚?/font> 英文名稱(EN):Zeatin (≥98%, cell culture tested)規(guī)格(SP):5MG
鹽達莫司汀d5 英文名稱(EN):Thymine (≥99.0%)規(guī)格(SP):5G
鹽海拉明 英文名稱(EN):Thymidine (≥98%, cell culture tested)規(guī)格(SP):1G
鹽海拉明(標準品) 英文名稱(EN):Citric acid (USP grade, 99.500.5%)規(guī)格(SP):100G
鹽海拉明d6 英文名稱(EN):4Chloronaphthol (≥98%, 4CN)規(guī)格(SP):5G
鹽海索(標準品) 英文名稱(EN):Cesium chloride (for molecular biology...規(guī)格(SP):5G
鹽脒 英文名稱(EN):Calcium chloride dihydrate (cell cultu...規(guī)格(SP):100G
鹽雙胍/降糖靈/鹽福明 英文名稱(EN):Sodium Butyrate規(guī)格(SP):25G
鹽雙胍/降糖靈/鹽福明(標準品) 英文名稱(EN):Betaine hydrochloride (≥99.0%)規(guī)格(SP):100G
鹽哆(>98%,BC ) 英文名稱(EN):Acetylcholine chloride (≥99%, TLC)規(guī)格(SP):25G
鹽哆 英文名稱(EN):Acetylcholine chloride (cell culture t...規(guī)格(SP):25G
鹽格列(標準品) 英文名稱(EN):3',5'Dimethoxy'hydroxyacetophene...規(guī)格(SP):1G
鹽達明 英文名稱(EN):transZeatin (≥97%, cell culture test...規(guī)格(SP):10MG
鹽基肼 英文名稱(EN):Xanthine (≥99.5%, HPLC)規(guī)格(SP):1G
細胞分裂周期樣激酶2抗體200mg腦心浸出肉湯(BHI)24169-02-6566-27-896T鈣結(jié)合蛋白(CR)HPLC≥98%促卵泡素檢測試劑盒20mgTRHR989-51-5化學試劑轉(zhuǎn)移酶(AMT)20mg桿菌肉湯培養(yǎng)24169-02-626093-31-296T鈣結(jié)合蛋白(CR)HPLC≥98%促狀腺素受體檢測試劑盒20mgBCAS4989-51-5化學試劑釉原蛋白Y-連鎖(AMY)
20mg桿菌肉湯培養(yǎng)24169-02-626093-31-296T鈣結(jié)合蛋白(CR)HPLC≥98%促狀腺素受體檢測試劑盒20mgBCAS4989-51-5化學試劑釉原蛋白Y-連鎖(AMY)200mg胰蛋白胨大豆肉湯 (TSB)443-48-1105454-04-496T鈣結(jié)合蛋白(CR)HPLC≥98%促狀腺素受體檢測試劑盒20mgCLDN5115-32-2化學試劑釉原蛋白X-連鎖(AMX)
200mg胰蛋白胨大豆肉湯 (TSB)443-48-1105454-04-496T鈣結(jié)合蛋白(CR)HPLC≥98%促狀腺素受體檢測試劑盒20mgCLDN5115-32-2化學試劑釉原蛋白X-連鎖(AMX)20mg營養(yǎng)肉湯443-48-1531-59-996T155kDa核孔蛋白(NUP155)HPLC≥98%促狀腺素釋放激素檢測試劑盒20mgGA1912-24-9化學試劑成釉細胞蛋白(AMBN)
20mg營養(yǎng)肉湯443-48-1531-59-996T155kDa核孔蛋白(NUP155)HPLC≥98%促狀腺素釋放激素檢測試劑盒20mgGA1912-24-9化學試劑成釉細胞蛋白(AMBN)50mgTHB肉湯 Todd-Hewitt肉湯443-48-190332-63-196T能受體α1A(ADRα1A)HPLC≥40%促狀腺素檢測試劑盒20mgMID1化學試劑尿囊酶(ALLC)
50mgTHB肉湯 Todd-Hewitt肉湯443-48-190332-63-196T能受體α1A(ADRα1A)HPLC≥40%促狀腺素檢測試劑盒20mgMID1化學試劑尿囊酶(ALLC)500mgTHB肉湯 Todd-Hewitt肉湯70458-96-790332-66-496T多巴受體D1(DRD1)HPLC≥98%促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3檢測試劑盒20mgAs-Ab5234-68-4化學試劑胍脲水解酶(AGMAT)