番紅O染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊脂氧素A4(LXA4)試劑盒 Anti-CSF2RB Antibody生長抑制因子基因1抗原
綿羊轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒Anti-CSH1 Antibody抑制素α抗原
綿羊皮膚T相關(guān)抗原(CLA/CTAGE)試劑盒 Anti-CSNK1G1 Antibody抑制素beta A抗原
綿羊Preptin 蛋白(Preptin)試劑盒Anti-CSN

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購,！

產(chǎn)品分類：微生物染色

儲存條件：室溫,12個月

用途：細(xì)胞核、染色體和植物木質(zhì)部等染色

注意事項(xiàng)：屬于堿性染料,能溶于水和酒精,。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣,，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存，在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

孟氏假單胞菌CD36抗體Human Pro-MMP-1(pro-Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit人髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)免疫試劑盒

畢赤酵母固合成CYP11B2抗體Human pNF-H(Phosphorylated Neurofilament H) ELISA Kit人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)免疫試劑盒

漢遜德巴酵母7號染色體開放閱讀框16抗體Human PP(Pepsin) ELISA Kit人髓鞘蛋白P0(MPZ)免疫試劑盒

香矛假單胞菌10號染色體開放閱讀框62抗體Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit人髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白Human PP13(Placental Protein13) ELISA Kit人髓磷脂P2蛋白(PMP2)免疫試劑盒

亮白曲霉酪蛋白激casein kinase Iα抗體Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)免疫試劑盒

米曲霉磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體Human Pro-MMP-10(Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit人髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒

干草寒冷桿菌磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit人性鐵蛋白(AIF)免疫試劑盒

Sinomonas flave肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白CAPG抗體Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit人性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit人性磷(ACP)免疫試劑盒

假諾氏菌Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Human PRB1(Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit人性富亮核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌CD96抗體Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit人性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒

平菇貓眼綜合征染色體候選基因2抗體Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人四氫生物蝶呤(BH4)免疫試劑盒

釀酒酵母1號染色體開放閱讀框146抗體Human PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit人四連接(CLEC3B)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌1號染色體開放閱讀框150抗體Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit人死亡相關(guān)蛋白1(DAP/DAP1)免疫試劑盒

黑曲霉1號染色體開放閱讀框156抗體Human PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit人絲裂原活化蛋白激激6(MKK6)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRCD5分子試劑盒二羥E

麥斑點(diǎn)附球霉Epicoccum│tritici Henn. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCD4分子試劑盒二氫麻醉椒苫

普勞瑟爾氏菌Prauserella│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCD45分子試劑盒二氫醉椒
番紅O染色液ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit  人乙chun脫氫mei規(guī)格： 48T

RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit  人Rho家族GTPmei1規(guī)格： 48T

RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit  人受體TNFRSF結(jié)合絲氨suan蘇氨suan激mei2規(guī)格： 48T

PLSCR1(Human phospholipid scramblase 1) ELISA KIT  人磷脂爬行mei1規(guī)格： 48T

HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1) ELISA Kit  人3-羥基-3-jia基戊二酰輔meiA合mei1規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。