詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體 |
英文名稱 | BCCIP |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
百里標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Thymol
克沙相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
他唑坦標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Tazobactam
異抗壞血標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Erythorbic Acid
美沙拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Mesalamine
去替林鹽鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:rtriptyline Hydrochloride
5基海因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:5Phenylhydantoin
福辛普利標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Fosipril Sodium
阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
海拉明檸檬鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Diphenhydramine Citrate
1十八 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1Octadecene 含量:CP,,1718%
1十六 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn) 1Hexadecal 含量:AR,99%
1十四碳 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn) 1Tetradecene 含量:AR,,92%
1十五 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1Pentadecal 含量:CP,,98%
1十一 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn) 1Undecene 含量:LR
1磺 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Sodium1pentanesulfonate 含量:AR,,99.9%
1辛磺 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn) Sodium1octanesulfonate 含量:BR,99%
1代正辛 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn) 1Bromooctane 含量:AR,,47.8%
1庚 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1Bromoheptane 含量:超純,,99.995%
1基(3二基基基)碳二亞鹽鹽 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn) EDAC•HC1 含量:高純,,99%
乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體Bradyrhizobium japonicum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于分類學(xué)研究培養(yǎng)基: 63生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Lophodermium australe Dearn.分離基物: 針葉病斑提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25-27存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Mycobacterium tuberculosis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Proteus mirabilis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Bacillus cereus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0003生長(zhǎng)條件: 35-37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 常用的工程宿主菌培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Bacillus sphaericus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂分:蛋白胨 5.0g,,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,,瓊脂 15.0g,,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,,則有利于產(chǎn)生芽孢,。生長(zhǎng)條件: 35-37℃,好氧生長(zhǎng)特性: 桿狀,,G+,,形成卵圓形內(nèi)生芽孢,好氧,??赡?%-5%NaCl濃度。葡萄糖,、麥芽糖,、蔗糖、海藻糖產(chǎn)酸,;乳糖,、果糖、半乳糖,、棉子糖,、甘露醇、木糖不產(chǎn)酸,。不分解淀粉,、硫胺素,分解木質(zhì)素,,接觸酶,、氧化酶陰性。存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Verrucosispora sp.分離基物: 海棉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗瘧疾培養(yǎng)基: CM0039生長(zhǎng)條件: 35-37C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
Sulfitobacter pontiacus分離基物: 水樣/海冰提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 15℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法