詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 12號染色體開放閱讀框4抗體 |
英文名稱 | C12ORF4 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
β丙氨(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%(T),標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥97%
D色氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D酪氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
D組氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:95%
D丙氨鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98% ≥97%
D丙氨叔丁鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.99純度:≥95%
D精氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
非對稱二基精氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,鹽鹽形式,,美國進(jìn)口純度:≥95%
N'基D精氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
D天冬酰,一水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.99純度:≥98%
D天冬氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
D天冬氨4叔丁 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
D谷氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
TLCK(進(jìn)分) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:進(jìn)分,sigma T7254純度:≥99%
甘氨酰L酪氨,;甘洛二肽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR,水合物純度:≥98%
D亮氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
PSF2 PSF2蛋白一抗 * 0.2ml Inulin from chicory
PTOP 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白一抗 * 0.2ml Malachite green
RABGAP1 Rab蛋白GTP酶激活蛋白1一抗 * 0.2ml PEG 2000
RCL/c Myc responsive cMyc應(yīng)答蛋白一抗 * 0.2ml Thiosemicarbazide
RINT1 胞膜間內(nèi)質(zhì)網(wǎng)調(diào)節(jié)蛋白1一抗 * 0.2ml Iron (II) chloride, tetrahydrate
RMND1 減數(shù)分裂同源蛋白1一抗 * 0.2ml Molybdic acid
SGTA 小谷氨酰三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α一抗 * 0.2ml Eprosartan mesylate
SUGT1 SUGT1蛋白一抗 * 0.2ml Benzamidine HCl
12號染色體開放閱讀框4抗體鮭色鎖擲孢酵母TASK 3/KCNK9 酸敏感性鉀離子通道蛋白抗體100 ul
檸檬酸桿菌屬TSLP 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素-1抗體100 ul
靈芝Myosin-XVIIIb 肌球蛋白XVIIIb抗體100 ug
糙皮側(cè)耳RBPJK/RBP-J Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白RBPJK抗體100 ul
膠韌革菌(榆耳,,榆蘑)Maltose Binding Protein/MBP 麥芽糖結(jié)合蛋白抗體100 ul
阿氏絲孢酵母HPV33 E6 人類狀瘤病毒33抗體100 ul
雅致放射毛霉HPV33 E7 人類狀瘤病毒33抗體100 ul
紅曲紅曲(斜面)PHGDH 磷酸甘油酸脫氫酶抗體100 ul
停滯棒桿菌PASK/STK39 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶39抗體5 mg
多粘芽孢桿菌HES1 轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體100 ul
白色念珠菌Factor VIII 第八因子抗體100 ul
醋酸桿菌屬Noggin 指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體100 ul
羊肚菌屬(斜面)GGT1/CD224 γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶抗體100 ul
水井坊梭菌TAGL2/TAGLN2 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2抗體100 ul
釀膿鏈球菌Peroxiredoxin 2/PRXII 硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體100 ul
萊氏曼氏乳桿菌IL-8/CXCL8 白介素8抗體100 ul
親和素鏈霉菌VIP Receptor 1/VAPC1 血管活性腸肽受體-1抗體100 ul
被孢霉屬(斜面)Desmocollin 2 橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體10 ml