詳細介紹
產(chǎn)品分類:染色其他
儲存條件:室溫,12個月
用途:生物染色
注意事項:主要由結(jié)晶紫和無水甲醇組成,稀釋20倍后使用,。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點,,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
結(jié)晶紫甲醇溶液 | 100ml | FS-R7154 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水,、純水洗凈,烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,;柱溫120℃;進樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃;分流進樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1,、3,、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,,培養(yǎng)基,,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,,哺乳動物細胞50-500μg/mL,;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,,可設定50,100,,250,500,,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當細胞過于稠密,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
根瘤菌膜蛋白Derlin抗體Human NFAT5(Nuclear factor of activated T-cells 5) ELISA Kit人Na+/H+交換體3(NHE3)免疫試劑盒
藤黃微球菌二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移抗體Human PAPD4 (Poly(A) RNA polymerase GLD2) ELISA KIT人N1,N12-二乙酰基精 免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體Human NOD1 (Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 1) ELISA KIT人N(ε)羧乙基賴(CEL)免疫試劑盒
*灰葡萄孢菌間粘附分子整合蛋白3抗體Human ODC1(Ornithine decarboxylase) ELISA Kit人N -甲基- D -天冬抗體IgG(NMDA Antibody IgG)免疫試劑盒
杰氏假單胞菌DNA依賴性蛋白激抗體Human OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) ELISA KIT人MYC誘導核抗原(MINA)免疫試劑盒
霍亂弧菌磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human OPHN1 (Oligophrenin-1) ELISA KIT人MAX二聚化蛋白1(MXD1)免疫試劑盒
須殼孢磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human OPALIN (Opalin) ELISA KIT人MAP磷雙特異性磷1(DUSP-1)免疫試劑盒
斑玉蕈蓬亂蛋白2抗體Human OBFC1 (CST complex subunit STN1) ELISA KIT人L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒
文昌野野村氏菌防御α5抗體Human OCM(Oncomodulin-1) ELISA Kit人L-腎上腺免疫試劑盒
粉狀畢氏酵母鋅離子結(jié)合蛋白DTX2抗體Human NRARP (Notch-regulated ankyrin repeat-containing protein) ELISA KIT人L-乳脫氫(L-LDH)免疫試劑盒
NCI-H647(人肺癌)(通過STR鑒定)EYA3蛋白抗體Human OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) ELISA KIT人L-基氧化(LAO)免疫試劑盒
乳桿菌屬痛感蛋白抗體Human OPALIN (Opalin) ELISA KIT人Klotho 免疫試劑盒
短波單胞菌屬翻譯延伸因子EF-1 α2抗體Human NHEJ1 (Non-homologous end-joining factor 1) ELISA KIT人KI-67抗原(Ki-67)免疫試劑盒
硫色曲霉延伸因子EF-1δ抗體Human NRP2 (Neuropilin-2) ELISA KIT人Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)免疫試劑盒
解脂假絲酵母解脂變種延伸因子EF-1 γ抗體Human OBFC1 (CST complex subunit STN1) ELISA KIT人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)免疫試劑盒
雞腿菇磷化真核翻譯延長因子2抗體Human NSMAF (Protein FAN) ELISA KIT人Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)免疫試劑盒
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽
中間根瘤菌Mesorhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,溶劑:沒食子乙酯
恩氏菌Rahnella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品黃芪黃
結(jié)晶紫甲醇溶液EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白規(guī)格: 48T
f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白規(guī)格: 48T
PRM1(Human Protamine 1) ELISA Kit 人1規(guī)格: 48T
HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血紅蛋白規(guī)格: 48T
PAIg(Human platelet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關免疫球蛋白規(guī)格: 48T