詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 |
英文名稱 | phospho-AMPK alpha 2 (Ser345) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
美替拉標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Metyrapone
阿維A相關(guān)物質(zhì)B標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
呋塞米標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Furosemide
水楊標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Sodium Salicylate
西他唑相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
醋卡尼標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Flecainide Acetate
十烴季標準品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Decamethonium Bromide
左卡尼汀標準品 規(guī)格:400mg 英文名稱:Levocarnitine
鹽芐標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
二類殘留溶劑1,2二標準品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:
NL異白 進口,、國產(chǎn) NAcetylLisoleucine 含量:BR,98%
N基 進口,、國產(chǎn) NAcetylglycine 含量:BR,,99%
N 進口,、國產(chǎn) Acetanilide 含量:CP
N基DL色 進口、國產(chǎn) NAcetylDLtryptophane 含量:BR,,98.5%
N基L酪 進口,、國產(chǎn) NAcetylLtyrosine 含量:BR,98%
N基 進口,、國產(chǎn) Acetoacetanilide 含量:BR,,28%
N葡萄糖 進口、國產(chǎn) DGlcNAc 含量:高純,,97%
N月桂酰肌 進口,、國產(chǎn) SLS 含量:IND
O(4羥基3,5二基)3,5二L酪 進口、國產(chǎn) T4 含量:BR,,98%
O(IH并三唑1基)N,N,N’,N’四基異脲六 進口,、國產(chǎn) HBTU 含量:BR,99%
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體cath-D(Human cathepsin D) 檢測試劑盒 組織蛋白酶D* 規(guī)格: 48T/96T
Cath Ab(Human Cathepsin Antibodies) 檢測試劑盒 組織蛋白酶抗體* 規(guī)格: 48T/96T
Casp-9(Human Caspase-9) 檢測試劑盒 胱天蛋白酶9* 規(guī)格: 48T/96T
Casp-9 檢測試劑盒 胱天蛋白酶9* 規(guī)格: 48T/96T
Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) 檢測試劑盒 凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4* 規(guī)格: 48T/96T
Casp-3(Human Caspase 3) 檢測試劑盒 胱天蛋白酶3* 規(guī)格: 48T/96T
Casp-3 檢測試劑盒 胱天蛋白酶3* 規(guī)格: 48T/96T