詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體 |
英文名稱 | BIG1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
康唑 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
N-去基舒尼替尼 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
N,N-二去基舒尼替尼鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
舒尼替尼-d10 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
他克莫司-13C,,D2(主要的) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
24,32-雙-O-(tert-butyldimethylsilyl)-他克莫司 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
(Z) 4-羥基基它莫西芬-d5 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥99%
(E/Z)-N,N-二去基-4-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥90%
4'-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥90%
β-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
順式-β-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
順式-α-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
N-氧基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
α-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥95%
N-去基-4'-羥基它莫西芬 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥96%
N-去基它莫西芬鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進口純度:≥96%
ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體Escherichia coli分離基物: LB培養(yǎng)基提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 慶大霉素抗性基因cassette培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Anabaena sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 異型胞分化調(diào)控研究培養(yǎng)基: 48生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法
Lactobacillus pentosus分離基物: 白菜泡菜提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 發(fā)酵泡菜制品培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Aspergillus sydowii分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 產(chǎn)生蛋白酶培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié),;真空冷凍干燥
Bacillus licheniformis (Weigmann) Chester分離基物: 植物根際提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 312生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Amanita sp.分離基物: 組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-30存儲條件: 定期移植法
Anabaena sp.分離基物: 環(huán)境水樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 異形胞分化研究培養(yǎng)基: 48生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
干酪棒桿菌(乳酪棒桿菌)種屬: Corynebacteriumcasei分離基物: 奶酪安全等級: 1模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 109或114生長條件: 30℃