詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 肌動蛋白樣蛋白6A抗體 |
英文名稱 | BAF53A |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
鈧標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L H3) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0mol/L H3純度:>95%
反式丁醛(standard for GC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC純度:>95%
十二(Standard for GC,≥99.5% (GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC)純度:>95%
正癸(Standard for GC,>99%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)純度:>95%
己二二(standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)純度:>95%
馬來二丁(standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)純度:>95%
二基亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,≥99.95%(GC)純度:>95%
正癸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)純度:>95%
琥珀二乙(standard for GC,≥99.6%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.6%(GC)純度:>95%
癸二二乙(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)純度:>95%
二十二(standard for GC,≥99.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.0%(GC)純度:>95%
三十二(standard for GC,≥98.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥98.0%(GC)純度:>95%
正庚(Standard for GC,>99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC)純度:>95%
γ 丁內(nèi)(GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.9%(GC)純度:>95%
丙位庚內(nèi)(Standard for GC ,>98.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC)純度:>95%
(+)葑(standard for GC, ≥99.5% (GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC)純度:>95%
Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2一抗 * 0.2ml Asulam
Plakophilin 1 橋粒斑菲素蛋白1一抗 * 0.2ml Bepotastine besilate
phosphoALK/CD246(Tyr1604) 化間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.1ml Sodium copper chlorophyllin
phosphoALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 化間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.1ml Neochlorogenic acid
phosphoALK/CD246(Tyr1586) 化間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.1ml Ivabradine HCl
SMOC2 分泌模塊化鈣結(jié)合蛋白2一抗(平滑肌相關(guān)蛋白2) * 0.2ml Xanthophyll
Sprouty 2 快速發(fā)育生長因子同源蛋白2一抗 * 0.1ml Xanthophyll
THSD1 血小板跨膜反應(yīng)蛋白1一抗 * 0.2ml Xanthophyll
肌動蛋白樣蛋白6A抗體Valsa mali Miyabe & G. Yamada分離基物: 蘋果樹樹皮提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 進行分析檢測及抗病性鑒定,,指導(dǎo)。培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Alternaria sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Klebsila pneumoniae分離基物: 痰提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Aspergillus niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Bacillus cereus分離基物: 土壤/未開發(fā)樹林表層土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/土壤耐鹽菌培養(yǎng)基: 1001生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Myrothecium roridum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分解纖維素。培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;定期移植法
Pseudoalteromonas atlantica分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
黑胡桃鏈霉菌種屬: Streptomyces nogalater提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain; Produces nogalamycin培養(yǎng)基: 0329生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Cephalosporium sp.分離基物: 云南迪慶殼孢蟲草提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 蟲草屬無性世代真菌研究,。培養(yǎng)基: 14生長條件: 15℃存儲條件: 定期移植法