詳細(xì)介紹
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | AIMP2抗體 |
英文名稱 | AIMP2 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善??贵w的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無(wú)菌采制)
角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子AR英文名稱:Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin, KAF/AR
活化素AACV-A英文名稱:Mouse Activin A, ACV-A
抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體TPO-Ab英文名稱:Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody, TPO-Ab
腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF英文名稱:Mouse Brain derived neurotrophic facor, BDNF
凋亡誘導(dǎo)因子AIF英文名稱:Mouse apoptosis inducing factor, AIF
骨成型蛋白2BMP-2英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein 2, BMP-2
骨成型蛋白4BMP-4英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein 4, BMP-4
骨成型蛋白受體1ABMPR-1A英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A, BMPR-1A
堿性磷酸酶ALP英文名稱:Mouse alkaline phosphatase, ALP
血管生成素4ANG-4英文名稱:Mouse Angiopoietin 4, ANG-4
骨成型蛋白受體ⅡBMPR-Ⅱ英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ, BMPR-Ⅱ
CD30分子CD30英文名稱:Mouse Cluster of differentiation 30, CD30
嗜酸粒細(xì)胞趨化因子ECF英文名稱:Mouse eosinophil chemotactic factor, ECF
紅細(xì)胞生成素EPO英文名稱:Mouse Erythropoietin, EPO
凋亡相關(guān)因子FAS/CD95英文名稱:Mouse Factor-related Apoptosis, FAS
AIMP2抗體Candida sp.分離基物: 污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 28-42℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Xanthomonas pruni (Smith) Dowson分離基物: 葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 26存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Ganoderma lucidum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于食用菌,。培養(yǎng)基: CM0017生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 礦物油法
鏈球菌種屬: Streptococcus sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: P Lancefid培養(yǎng)基: CM0109生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Candida fukuyamaensis分離基物: 樹膠提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Trichoderma harzianum Rifai分離基物: 根際提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25-28存儲(chǔ)條件: 定期移植法
斯氏普羅威登斯菌種屬: Providencia stuartii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: quality control strain, quality control strain for培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,,NaCl 5.0g,,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,,pH7.0,。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢,。pH7.0,。121℃,15min,。
生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Lactococcus lactis subsp.lactis分離基物: 原料乳提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵酸奶等乳制品培養(yǎng)基: CM0842生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonla typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi D4 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法