詳細(xì)介紹
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 碳酸酐酶9抗體 |
英文名稱 | Carbonate dehydratase IX |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn),。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4,、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無(wú)菌采制)
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)松樹(shù)土類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus pinihumi
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)博斯氏菌屬拉丁屬名: Bosea lathyri
小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)芽孢桿菌屬拉丁屬名: Bacillus sp.
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)剛毛絲毛伏革菌拉丁屬名: Hyphoderma setigerum
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)吉氏根瘤菌拉丁屬名: Rhizobium giardinii
小鼠血栓前體蛋白(TpP)微球菌屬拉丁屬名: Micrococcus sp.
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)小托柄鵝膏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
小鼠抑制素B(INH-B)阿魏側(cè)耳注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)大腸桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)巴斯德酵母拉丁屬名: Saccharomyces pastorianus
小鼠胰島素受體β(ISR-β)彎曲高溫單孢菌用途: Degrades cellulose
小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)桑莖點(diǎn)霉用途: 植物病原物,為該病防治提供依據(jù)
小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)南方異擔(dān)子菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)煙曲霉拉丁屬名: Aspergillus fumigatus Fresen
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)灰平鏈霉菌用途: 分類
碳酸酐酶9抗體1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框114抗體2-Hydroxy-3,4,5,6-tetramethoxychalcone中文名:別名:分子式:C19H20O6
CD93抗體Sulfuretin中文名:別名:分子式:C15H10O5
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體2'-O-Methylhelichrysetin中文名:別名:分子式:C17H16O5
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框109抗體2',4'-Dihydroxy-4,6'-dimethoxydihydrochalcone中文名:別名:分子式:C17H18O5
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框110抗體Pedicin中文名:別名:分子式:C18H18O6