詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 20號(hào)染色體開放閱讀框187抗體 |
英文名稱 | C20orf187 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
己孕標(biāo)準(zhǔn)品Rat AGRP ELISA Kit純度:0.99
氫醌標(biāo)準(zhǔn)品Rat 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA KIT純度:0.98
氫甲噻標(biāo)準(zhǔn)品Rat 8-iso-Prostaglandin F2a純度:0.998
雙氫噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品Rat 8-hydroxy-2-deoxyguasine ELISA Kit純度:0.989
白毛莨堿標(biāo)準(zhǔn)品Rat Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit純度:0.999
鹽肼屈嗪標(biāo)準(zhǔn)品Rat Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit純度:0.999
絨毛膜促性激素標(biāo)準(zhǔn)品Rat 25(OH)D3 ELISA KIT純度:0.999
Duck Immuglobulin E,IgE ELISA Kit鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測(cè)定醋酸地孕酮規(guī)格:100mg
Duck major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit 鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T常溫,,避光含量測(cè)定睪酮 規(guī)格:100mg
Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit 鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T常溫,,避光含量測(cè)定布美他尼規(guī)格:100mg
Duck Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光檢查用氨環(huán)酸規(guī)格:50mg
Duck Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T常溫,,避光檢查用胡椒規(guī)格:50mg
Duck Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T常溫,,避光含量測(cè)定谷胺規(guī)格:50mg
20號(hào)染色體開放閱讀框187抗體100mg透析袋 即用型 扁寬31 截留分子量500-100023670-94-296T載脂蛋白A2(APOA2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原肽檢測(cè)試劑盒5mgALP5290-62-0化學(xué)試劑TNF受體關(guān)聯(lián)子5(TRAF5)25mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量8000570-72-996T載脂蛋白B(APOB)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原末端肽檢測(cè)試劑盒5mgSE5290-62-0化學(xué)試劑Toll樣受體銜接分子1(TICAM1)
25mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量8000570-72-996T載脂蛋白B(APOB)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原末端肽檢測(cè)試劑盒5mgSE5290-62-0化學(xué)試劑Toll樣受體銜接分子1(TICAM1)50mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量1000019716-26-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原端肽檢測(cè)試劑盒5mgSE485-47-2化學(xué)試劑TANK結(jié)合激酶1(TBK1)
50mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量1000019716-26-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原端肽檢測(cè)試劑盒5mgSE485-47-2化學(xué)試劑TANK結(jié)合激酶1(TBK1)10mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量112244-29-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原C端肽檢測(cè)試劑盒5mgIL-39485-47-2化學(xué)試劑V-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌同源物(MAF)
10mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量0112244-29-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原C端肽檢測(cè)試劑盒5mgIL-39485-47-2化學(xué)試劑V-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌同源物(MAF)50mg透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量250006025-53-222149-69-596T多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原檢測(cè)試劑盒5mgGzms-A485-47-2化學(xué)試劑V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌同源物(KRAS)
50mg透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量250006025-53-222149-69-596T多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原檢測(cè)試劑盒5mgGzms-A485-47-2化學(xué)試劑V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌同源物(KRAS)20mg透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量500006025-53-259092-94-396T腫瘤蛋白p53(TP53)HPLC≥98%Ⅲ型膠原蛋白檢測(cè)試劑盒5mgPF;PFP90-44-8化學(xué)試劑白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)