詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 程序性死亡配體2抗體 |
英文名稱 | B7-DC |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
活化蛋白C(APC) 根瘤菌拉丁屬名: Rhizobium tubonense
蛋白C(Protein C)*冬蟲夏草拉丁屬名: Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc.
血小板因子3(PF-3)鐮刀菌屬注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
血紅蛋白C(HbC) 谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
纖維蛋白(Fibrin) 除烴海桿狀菌拉丁屬名: Marinobacter hydrocarbonoclasticus
血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB) 刺孢小克銀漢霉輪生變種拉丁屬名: Cunninghamella echinulata var. verticillata
纖溶酶原激活劑(PLGA) 叢毛紅曲注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg) 石狀青霉拉丁屬名: Penicillium lapidosum
前白蛋白(PA) 豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS7規(guī)格: 1ml
類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
補(bǔ)體片斷3b(C3b)魯氏接合酵母拉丁屬名: Zygosaccharomyces rouxii
游離蛋白S(FP-S)米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn
纖溶酶原(Plg) 浸麻類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus macerans
血清白蛋白(HSA)短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas staleyi
血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1) Paenibacillus拉丁屬名: Paenibacillus sp.
程序性死亡配體2抗體1號染色體開放閱讀框50抗體2,3-Dimethoxyxanthone中文名:2,3-二甲氧基呫噸酮別名:分子式:C15H12O4
1號染色體開放閱讀框49抗體Swertianin 2-O-α-L- rhampyrasyl-(1→2)-β-D-xylopyraside中文名:別名:7-O-[α-L-Rhampyrasyl-(1→2)-β-D-xylo pyrasyl]-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone分子式:C25H28O14
1號染色體開放閱讀框53抗體1,5-Dihydroxy-6,7-dimethoxyxanthone中文名:1,5-二羥基-6,7-二甲氧基呫噸酮別名:分子式:C15H12O6
1號染色體開放閱讀框54抗體Symphone I中文名:別名:分子式:C38H48O6
1號染色體開放閱讀框55抗體Hyperxanthone中文名:別名:分子式:C18H14O5