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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
溴麝香草酚藍(lán)指示劑 | 100ml | FS-R6911 |
產(chǎn)品分類(lèi):指示劑
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:?jiǎn)我凰釅A指示劑,又稱(chēng)溴百里酚藍(lán)指示劑,,常用于實(shí)驗(yàn)室用水指示劑法檢查pH值
注意事項(xiàng):溴麝香草酚藍(lán)變色范圍:pH6.0-7.6,顏色由黃變藍(lán),。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
1,4,7-三基哌啶-1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二... Coronene一種腫瘤抑制基因抗體(N端)包裝5g
1-(6-Chloro-9H-咔唑-2-yl)乙?;?... Coronene (purified by sublimation)腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體包裝1g
1-β-D-呋核亞硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酯 Corannulene維生K依賴的蛋白C重鏈抗體包裝5g
1-含氧的 2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole神經(jīng)叢蛋白A1抗體包裝1g
1-基-煙酰化物 2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazolep21激活激4抗體包裝25g
1-基 9,10-Di(1-naphthyl)anthracene磷化p21激活激4/5/6抗體包裝5g
1-基吲唑-3-羧(格司瓊雜質(zhì)D) 2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene磷化p21激活激1/2抗體包裝100ml
1-萘乙酰精三鹽 Perylene磷化p21激活激1/2抗體包裝25ml
1-羥基(雜質(zhì)))(對(duì)映異構(gòu)體混合物) Perylene (purified by sublimation)磷化p21激活激2抗體包裝5ml
1-去 2-基格司瓊(格司瓊雜質(zhì)A) 1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene磷酯Cγ2抗體包裝10g
1-去 格司瓊(格司瓊雜質(zhì)B) Triphenylene磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體包裝50g
1-月桂酰-3- meso-Tetraphenylchlorin磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體包裝100g
10-反式-阿托伐他(阿托伐他雜質(zhì)AT10)((3... Tetraphenylporphyrin (Chlorin free)P73腫瘤抑制基因抗體包裝25g
10-反式-阿托伐他縮合物叔丁基酯 2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25g
10-羥基(對(duì)映異構(gòu)體混合物) 1,3-Diphenyl-1,3-propanedioneG蛋白偶聯(lián)受體p2y10抗體包裝5g
泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,,標(biāo)準(zhǔn)品過(guò)氧化試劑盒低聚果糖-蔗果五糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
桔灰青霉Penicillium│aurantiogriseum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRS轉(zhuǎn)移TT試劑盒低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,S構(gòu)型,,標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒低聚果糖-蔗果三糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
溴麝香草酚藍(lán)指示劑BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子規(guī)格: 48T
ALCAM(Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人白細(xì)胞活化黏附因子規(guī)格: 48T
ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人活化suA規(guī)格: 48T
NRG-1(human Neuregulin 1) ELISA Kit 人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1規(guī)格: 48T
ANP(Human Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 人心鈉肽規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線,,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜,;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,,100,,250,500,,750,,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。