甲基橙-酸性靛藍(lán)指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞唾液酸結(jié)合球蛋白樣凝集素10(SIGLEC10)試劑盒Anti-ABHD2 AntibodyPE-CY5標(biāo)記的驢抗兔IgG
雞大腦脂肪酸結(jié)合蛋白7(FABP7)試劑盒Anti-ACACA AntibodyAPC標(biāo)記的驢抗兔IgG
雞抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)試劑盒 Anti-ABHD8 AntibodyAlexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：混合酸堿指示劑,變色點(diǎn)pH4.1

注意事項(xiàng)：酸色：紫色,堿色：綠色,。終點(diǎn)附近指示劑顏色變化的參考顏色：pH4.1藍(lán)色,。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購(gòu),！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來(lái)水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量,，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線,，來(lái)確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

裂褶菌AP-1μ2抗體Human LRRC8C ELISA Kit小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒

柱形孢鏈霉菌肥大膜抑制性受體Allergin1抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒

傳染性支氣管炎病腦鈉通道蛋白1抗體Human LSAMP ELISA Kit小鼠胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒

土庫(kù)曼野野村氏菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit小鼠胰島降解(IDE)免疫試劑盒

黑木耳三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠胰島(INS)免疫試劑盒

黃桿菌甲胎蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit小鼠原激活肽(TAP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit小鼠-1(trypsin-1)免疫試劑盒

檸檬形克勒克酵母ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Human LRRC41 ELISA Kit小鼠(trypsin)免疫試劑盒

球孢白僵菌肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠胰α淀粉(AMY2A)免疫試劑盒

Rhizobium alkalisoli性鈣調(diào)蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒

產(chǎn)腸大腸埃希氏菌磷化CD156b抗體Human LRRC4C ELISA Kit小鼠一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒

產(chǎn)朊假絲酵母乙脫氫5抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠一氧化氮(NO)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌乙脫氫6抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠葉(FA)免疫試劑盒

假單胞菌溶血磷脂?；D(zhuǎn)移5抗體Human LRRC18 ELISA Kit小鼠氧化型(GSSG)免疫試劑盒

粉狀畢赤酵母遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體Human LRCH3 ELISA Kit小鼠氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫試劑盒

灰樹(shù)花G25免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體Human LRRC20 ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒

檸檬球菌Citricoccus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC胞外超氧化物歧化試劑盒3-乙南楝屬二酯

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR胞漿型磷脂A2-α試劑盒乙酰基二氫味草A

傘枝犁頭霉Absidia│corymbifera 質(zhì)量規(guī)格：BR包蟲(chóng)抗體IgG 羽扇烯
甲基橙-酸性靛藍(lán)指示劑CC16(Human Clara cell protein) ELISA Kit  人克拉拉細(xì)胞蛋白規(guī)格： 48T

HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha) ELISA Kit  人低氧誘導(dǎo)因子1α規(guī)格： 48T

MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit  人黑色su細(xì)胞規(guī)格： 48T

TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit  人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體規(guī)格： 48T

P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit  人P53規(guī)格： 48T