產(chǎn)品分類:指示劑
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:?jiǎn)我凰釅A指示劑
注意事項(xiàng):茜素變色范圍:pH5.5-6.8,顏色由黃變紫。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),,咨詢并訂購(gòu),!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
茜素指示劑 | 100ml | FS-R6909 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對(duì)照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來(lái)確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜,;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
(S)- 2,6-Dibromoanthraquinone磷化p21激活激1抗體包裝25g
(S)--5'-三磷鋰鹽 2,7-Dibromofluorene磷化p21激活激2抗體包裝100g
(S)-蘭索唑 2,7-Dibromo-9-fluorenone磷化p21激活激3抗體包裝25g
(S)-托洛爾 2,7-Dibromonaphthalene磷化p21激活激1/2/3抗體包裝100ml
(S)-異?;?β-D-葡萄糖苷 2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]磷化核糖體S6蛋白激抗體包裝25ml
(S)-普克索二鹽化物 4,7-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體包裝500ml
(S)-去二基西酞普蘭鹽鹽 2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體包裝25g
(S)-坦索羅辛鹽鹽 2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]前列腺特異膜抗原抗體包裝5g
(S)-咯 2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene磷脂酰肌激抗體包裝100g
(S)-西酞普蘭N-氧化物 2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體包裝25g
(S)-西替 2,5-Dibromothiazole蛋白激A抗體包裝5g
(S)-?;?β-D-葡萄糖苷 2,5-Dibromoselenophene蛋白激C beta 1/2抗體包裝1g
(S)-酰基-β-D-葡萄糖苷芐基酯 2,6-Dibromonaphthalene胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體包裝5g
(S)-腺苷,,環(huán)3',5'-(氫化硫代磷酯)三乙基 1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體包裝1g
(S)-鹽昔布寧 6,12-Dibromochrysene外周髓鞘蛋白-22抗體包裝5g
ATCC9341資源名稱: 嗜根考克氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品骨成型蛋白7試劑盒低聚果糖套裝(蔗果三糖;蔗果四糖;蔗果五
純白鏈霉菌Streptomyces│candidus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品骨成型蛋白2試劑盒維生E(醋酯);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
: Biggis資源名稱: 問(wèn)號(hào)狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品骨成型蛋白15試劑盒L-天門(mén)冬;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
茜素指示劑CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E選擇su規(guī)格: 48T
CCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜suan粒細(xì)胞趨化蛋白規(guī)格: 48T
ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 人鼠嗜suan粒細(xì)胞趨化因子規(guī)格: 48T
EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子規(guī)格: 48T
CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子規(guī)格: 48T