詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn),。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | ATP6V1B2蛋白抗體 |
英文名稱 | ATP6V1B2 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
白介素27IL-27英文名稱:Mouse Interleukin 27, IL-27
白介素23IL-23英文名稱:Mouse Interleukin 23, IL-23
心肌營養(yǎng)素1CT-1英文名稱:Mouse cardiotrophln 1, CT-1
脂蛋白αLp-α英文名稱:Mouse lipoprotein α, Lp-α
大內(nèi)皮素Big ET英文名稱:Mouse Big Endothelin, Big ET
凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原FⅧ-Ag英文名稱:Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen, FⅧ-Ag
凝血因子ⅨFⅨ英文名稱:Mouse Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ
凝血因子ⅩFⅩ英文名稱:Mouse coagulation factor Ⅹ, FⅩ
前心鈉肽Pro-ANP英文名稱:Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP
N端前腦鈉素NT-proBNP英文名稱:Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP
纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物PAP英文名稱:Mouse plasmin-antiplasmin complex, PAP
凝血酶抗凝血酶復(fù)合物TAT英文名稱:Mouse thrombin-antithrombin complex, TAT
抗凝血酶受體ATR英文名稱:Mouse anti-thrombin receptor, ATR
凝血酶受體TR英文名稱:Mouse thrombin receptor, TR
心肌肌鈣蛋白ⅠcTn-Ⅰ英文名稱:Mouse cardiac troponin Ⅰ, cTn-Ⅰ
ATP6V1B2蛋白抗體Lentinula edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
海利斯頓氏菌種屬: Listonla pagia分離基物: 水樣/海水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 參考菌株/菌種分類培養(yǎng)基: 471生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Mucor subtilissimus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
短小芽孢桿菌種屬: Bacillus pumilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 堿性蛋白酶培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pestalotiopsis sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Emericla nidulans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 遺傳工程培養(yǎng)基: 0002生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces griseus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0039生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Agrobacterium vitis分離基物: 水稻根際提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0063生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法