詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,。
產品名稱 | 錨蛋白重復域54抗體 |
英文名稱 | ANKRD54 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
化鉻六水(>98%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
鉀鉻十二水 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
鉻(>98%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
性紅B 進口/國產 規(guī)格:>60%,BS純度:≥98%
直接黃12 進口/國產 規(guī)格:>70%,BS純度:≥97%
肉桂酰(>98%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>98%,,BR純度:≥97%
肉桂油 進口/國產 規(guī)格:工業(yè)級純度:≥97%
檸檬醛(>95%,Pract Grade) 進口/國產 規(guī)格:>95%,Pract Grade純度:≥98%
檸嗪(>98%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
草鈷(>99%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>99%,BR純度:≥95%
刀豆素A(> 95%,BR) 進口/國產 規(guī)格:> 95%,BR純度:98%
溴化亞銅(>98%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
無水乙銅(>99%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>99%,BR純度:95%
溴化銅(>99%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>99%,BR純度:95%
檸檬銅(>98.5%,BR) 進口/國產 規(guī)格:>98.5%,BR純度:≥98%
氧化銅(>96.5%,Tech Grade) 進口/國產 規(guī)格:>96.5%,工業(yè)級純度:≥97%
IL11RA 白介素11受體α/IL11Rα一抗 * 0.2ml Imipenem and Cilastatin Sodium
KCNQ1 鉀離子通道蛋白家族KCNQ1一抗 * 0.1ml Vinpocetine
IL10 白細胞介素10一抗 * 0.1ml Phenytoin sodium
LIPG/Endothelial lipase 內皮脂肪酶一抗 * 0.2ml Oxcarbazepine
MSR1/CD204 巨噬細胞清道夫受體1/2/3一抗 * 0.2ml Oxcarbazepine
NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白一抗 * 0.2ml Hypericin
Perilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B一抗 * 0.2ml D(+)Glucopyrase 6phosphate
FLIP delta + gamma 凋亡調節(jié)蛋白δ+γ一抗 * 0.2ml DGluconate 6phosphate 3sodium salt
錨蛋白重復域54抗體Bacillus sp.分離基物: 活性污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
嗜酸乳桿菌種屬: Lactobacillus acidophilus提供形式: 凍干管安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 乳制品發(fā)酵,,《GB 4789.35-2010食品中乳酸菌檢驗》陽性對照菌株。培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,,牛肉粉 8.0g,,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,,硫酸鎂 0.2 g,,乙酸鈉 5.0 g,,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,,硫酸錳 0.05 g,,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL,。pH6.2±0.2,。121℃,15min,。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,,平板涂布,活化培養(yǎng),。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,,挑取接入平板或斜面,,培養(yǎng)。生長條件: 37℃,,厭氧存儲條件: 2-8℃,。-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Pleurotus nebrodensis (Inzengae) Quél.分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
米根霉種屬: Rhizopus oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Tryblidiopsis pinastri分離基物: 葉提供形式: 凍結物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: MEA生長條件: 25C存儲條件: -80℃冰箱凍結,;礦物油法
Name:Bacillus coagulans Hammer 1915 emend. De Clerck et al. 2004模式菌株: 未知
Paecilomyces sp.分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 大洋絲狀真菌培養(yǎng)基: 14生長條件: 10℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法,;-80℃冰箱凍結法
Micromonospora echinospora var.purpurea提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產生Gentamicin慶大霉素培養(yǎng)基: CM0394生長條件: 34C存儲條件: 真空冷凍干燥
Acinetobacter sp.分離基物: 活性污泥和工業(yè)廢水混合物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 用于廢水處理相關方向的研究培養(yǎng)基: 304生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法