詳細介紹
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化CREB-1抗體 |
英文名稱 | phospho-CREB-1(Ser129) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小鼠糖蛋白130(gp130)水稻節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter oryzae
小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)彎孢菌用途: 研究
小鼠γ干擾素(IFN-γ)大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)琉球曲霉拉丁屬名: Aspergillus luchuensis
小鼠白介素13(IL-13)近綠曲霉拉丁屬名: Aspergillus subolivaceus
小鼠白介素18(IL-18)綠垂曲霉拉丁屬名: Aspergillus viridinutans
小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) 球毛殼拉丁屬名: Chaetomium globosum
小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)直絲淡藍褐鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces coeruleofuscorectus
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
小鼠白介素10(IL-10) 單孢蟲道酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
小鼠白介素11(IL-11)橘色硬皮馬勃注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
小鼠白介素15(IL-15)蛛網(wǎng)不顯枝霉中華變種拉丁屬名: Aphanocladium aranearum var. sinense
小鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)需土節(jié)桿菌用途: 益生菌
小鼠白介素1α(IL-1α)葡萄球菌屬拉丁屬名: Staphylococcus sp.
小鼠白介素2(IL-2)草假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas graminis
磷酸化CREB-1抗體小鼠結膜成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠結膜上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠精原細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠晶狀體上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠頸動脈內(nèi)皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠頸動脈平滑肌細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。