詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。
產品名稱 | 腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體 |
英文名稱 | Contactin 3 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
β羥丁酸(β-OHB)中慢生華癸根瘤菌用途: 與紫云英共生結瘤固氮
高密度脂蛋白膽固(HDL-C)毛木耳(紫木耳,、黃背木耳)拉丁屬名: Auricularia polytricha (Mont.) Sacc.
高密度脂蛋白(HDL)支氣管敗血波氏菌拉丁屬名: bronchiseptica
α谷胱甘肽S轉移酶(α-GST)運動節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter agilis
同型半胱氨酸(Hcy)白僵菌用途: 害蟲生物防治
游離脂肪酸(FFA)釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
骨粘連蛋白(ON)米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
葉酸(FA)球毛殼拉丁屬名: Chaetomium globosum
內毒素(ET)大腸埃希菌拉丁屬名: coli
環(huán)孢素A(CsA)皺紋假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas corrugata
白三烯C4(LTC4)香菇屬(大斗菇)拉丁屬名: Lentinula sp.
細胞色素C(Cyt-C)釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
脂蛋白脂酶(LPL)細鏈格孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
脂蛋白α(Lp-α)蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)拉丁屬名: Bacillus cereus
骨膠原交聯(lián)(Cr)沙福芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus safensis
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)頭狀葡萄球菌用途: 昆蟲細胞培養(yǎng)污染防治研究
腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體α-L巖藻糖苷酶抗體17-Acetyloxy-6-chloro-1α-chloromethylpregna-4,6-diene-3,20-dione中文名:醋酸環(huán)丙氯地孕酮別名:分子式:C24H30Cl2O4
腎母細胞瘤X蛋白抗體17-Hydroxy-1a,2a-methylenepregna-4,6-diene-3,20-dione acetate中文名:別名:分子式:C24H30O4
腎母細胞瘤基因X染色體蛋白抗體4-(Phenylthio)benzyl alcohol中文名:別名:分子式:C13H12OS
磷酸神經膜抗體Fenticonazole nitrate中文名:硝酸芬替康唑別名:分子式:C24H21Cl2N3O4S
巖藻糖轉移酶8抗體2-Fluoroadesine中文名:別名:分子式:C10H12FN5O4