詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體 |
英文名稱 | CLLD6 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質,,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
試劑(≥85%(HPLC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥85%(HPLC)純度:≥98%
1,3二基5吡唑 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.96純度:≥98%
氟啶(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:95%
氟節(jié)(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
吡脲(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥95%
氟吡氧乙(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
麥穗寧(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥97%
雙氟草(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99.8%純度:≥98%
增甘膦(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
氟鈴脲(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99%純度:≥96%
環(huán)嗪(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,98%純度:≥99%
吡嘧?。藴势罚?/font> 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99.5%純度:≥98%
噻螨(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99.5%純度:98%
氟吡禾靈(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
吡蟲啉(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,98.5%純度:≥98%
稻瘟靈(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,97.5%純度:95%
TSSC3 腫瘤抑制轉移候選基因3一抗 * 0.2ml Sudan Blue II/Solvent Blue 35
TTI1 轉錄因子相互作用蛋白1一抗 * 0.2ml Methyl red
WDR61 WD重復膜蛋白61一抗 * 0.2ml mMethyl red
RBR2/Rb2 p130 視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白2一抗 * 0.2ml Methyl Red sodium salt
BRCC3/BRCC36 癌易感基因復合物亞基蛋白3一抗 * 0.2ml Cixacin
Casein Kappa/CSN3/COPS3 K酪蛋白一抗 * 0.1ml randrostenedione
CXXC5 二鍵氧化還原酶指蛋白5一抗 * 0.2ml Dapagliflozin propanediol hydrate
DMTF1 周期素D相互作用蛋白1一抗 * 0.2ml Anacetrapib;MK0859
慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體LTA (Human lymphotoxin Alpha,LTA) 檢測試劑盒 淋巴毒素α* 規(guī)格: 48T/96T
LSP(Human liver specific lipoprotein) 檢測試劑盒 抗肝特異性脂蛋白抗體* 規(guī)格: 48T/96T
L-Selectin/CD62L 檢測試劑盒 L選擇素* 規(guī)格: 48T/96T
L-Selectin/CD62L 檢測試劑盒 L選擇素* 規(guī)格: 48T/96T
LRP-6(Human low-density lipoprotein-receptor-related protein) 檢測試劑盒 低密度脂蛋白受體相關蛋白6* 規(guī)格: 48T/96T
LRP(Human Lung resistance-related protein) 檢測試劑盒 肺耐藥蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
LR/Ob-R(Human Leptin receptor) 檢測試劑盒 苗條素受體* 規(guī)格: 48T/96T